【摘要】：為了探究葡萄WRKY54基因的功能,以抗鹽葡萄品種Vidal Blanc為材料,采用同源克隆法克隆得到Vv WRKY54基因,并對其進(jìn)行生物信息學(xué)和表達(dá)特性分析。結(jié)果表明,Vv WRKY54基因c DNA序列為942 bp,編碼313個氨基酸。生物信息學(xué)分析結(jié)果表明,Vv WRKY54蛋白分子量約為35.3091 k Da,等電點(diǎn)為5.45,不穩(wěn)定系數(shù)為55.03,推測其為不穩(wěn)定蛋白,與已知毛果楊及擬南芥WRKY54蛋白高度同源;亞細(xì)胞定位預(yù)測結(jié)果顯示其主要存在于細(xì)胞核中。實(shí)時熒光定量PCR分析表明,Vv WRKY54在葡萄不同組織中均有表達(dá),其中在梢尖中表達(dá)量最高;鹽和低溫等逆境脅迫因子均能誘導(dǎo)Vv WRKY54上調(diào)表達(dá);此外,Vv WRKY54受水楊酸和一氧化氮誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá),其中水楊酸誘導(dǎo)Vv WRKY54相對表達(dá)量在12 h達(dá)到最大值,約為對照的50倍。推測Vv WRKY54在植物發(fā)育和抵御逆境脅迫中起著重要作用,這為進(jìn)一步闡明Vv WRKY54的功能及作用機(jī)制奠定了分子基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to study the function of the WRKY54 gene of the grape, the Vidal Blanc was used as the material to clone the Vv WRKY54 gene by using the homologous cloning method, and the bioinformatics and the expression characteristics of the Vv WRKY54 gene were analyzed. The results showed that the c-DNA sequence of the Vv WRKY54 gene was 942 bp, encoding 313 amino acids. The results of the bioinformatics analysis show that the molecular weight of the Vv WRKY54 protein is about 35.3091 k Da, the isoelectric point is 5.45, the instability coefficient is 55.03, it is presumed that it is an unstable protein, and is highly homologous to the known wild fruit Yang and the Arabidopsis thaliana WRKY54 protein; and the subcellular localization prediction result shows that it is mainly present in the nucleus. The real-time fluorescence quantitative PCR analysis showed that Vv WRKY54 was expressed in different tissues of the grape, in which the expression of Vv WRKY54 was the highest, and the stress-stress factors such as salt and low temperature could induce the up-regulation of Vv WRKY54. In addition, Vv WRKY54 was upregulated by salicylic acid and nitric oxide. In which the relative expression of the salicylic acid-induced Vv WRKY54 reached a maximum value at 12 h, about 50 times that of the control. It is suggested that Vv WRKY54 plays an important role in the development of plant and the resistance to stress, which lays a molecular basis for further elucidating the function and mechanism of Vv WRKY54.
【作者單位】： 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院/山東省高校植物生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31572107、31401844) 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)高層次人才科研基金(111339)
【分類號】：S663.1

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本文編號：2505216