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優(yōu)良動物源抗汞益生乳酸菌的篩選及其抗性基因的克隆

發(fā)布時間:2019-05-23 20:03
【摘要】:為了分離具有重金屬汞抗性的優(yōu)良益生乳酸菌,并挖掘細菌汞抗性的基因,應用于動物機體重金屬中毒的解毒治療,試驗從健康狐貍和貉子糞便中篩選出耐酸、耐胰酶、耐膽汁、抗菌并具有較高汞抗性的乳酸菌,采用16S rRNA基因序列分析鑒定,并用PCR方法擴增mer A基因,從72株優(yōu)良益生菌中逐級篩選出耐酸、耐胰酶、耐膽鹽、抗菌性能好并能耐受500 mg/L HgCl_2的高濃度重金屬汞的一株細菌,命名為CJT-KHg1,測定了其益生特性指標。結(jié)果表明:經(jīng)過16S rRNA序列分析,該菌株為乳酸片球菌;該菌株的mer A基因序列與克雷伯氏菌、陰溝腸桿菌、希瓦氏菌mer A基因序列的同源性達到99%,證明為乳酸片球菌;從該菌株中克隆到的汞抗性基因為汞還原酶基因(Mercury reductase)。
[Abstract]:In order to isolate excellent probiotic lactic acid bacteria with mercury resistance of heavy metals and excavate genes resistant to mercury in bacteria, and to apply them to detoxification and treatment of heavy metal poisoning in animals, acid and pancreatic enzymes were screened out from the feces of healthy foxes and raccoon dogs. Lactic acid bacteria resistant to bile and bacteria with high mercury resistance were identified by 16s rRNA gene sequence analysis, and mer A gene was amplified by PCR. Acid resistance, pancreatic enzyme resistance and bile salt tolerance were screened out step by step from 72 strains of excellent probiotics. A strain of bacteria with good antibacterial performance and tolerance to 500 mg/L HgCl_2 of high concentration of heavy metal mercury was named CJT-KHg1, to determine its probiotics. The results showed that the strain was Lactococcus lactis after 16s rRNA sequence analysis, and the homology of mer A gene sequence with Klebsiella, Enterobacter cloacae and Shiva mer A gene sequence was 99%, which was proved to be Lactococcus lactococcus, and the homology of Lactic acid A gene sequence between the strain and Klebsiella, Enterobacter cloacae and Shiva was 99%. The mercury resistance gene cloned from the strain was due to the mercury reductase gene (Mercury reductase).
【作者單位】: 東北農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學學院;
【基金】:黑龍江省大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目(201510224031)
【分類號】:Q93

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