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維氏氣單胞菌OmpAⅠ基因重組植物乳桿菌的構(gòu)建及其表達(dá)產(chǎn)物的免疫原性分析

發(fā)布時間:2019-05-16 03:06
【摘要】:為構(gòu)建維氏氣單胞菌OmpAⅠ基因重組植物乳桿菌并檢測其表達(dá)產(chǎn)物的免疫原性,將目的基因克隆至大腸桿菌-乳桿菌穿梭表達(dá)載體p SIP409中,并電轉(zhuǎn)至植物乳桿菌中,經(jīng)誘導(dǎo)后對表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行Western-blot分析。結(jié)果顯示,LP/p SIP409-OmpAⅠ重組植物乳桿菌出現(xiàn)一條約42 ku的印跡,與預(yù)期大小相符,表明重組蛋白具有反應(yīng)原性。LP/p SIP409-OmpAⅠ重組植物乳桿菌免疫鯽魚后,在第25天血清中Ig M水平達(dá)到高峰;RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)免疫后鯽魚肝、脾、腎及心組織中的細(xì)胞因子IL-8、IFN-γ與IL-1β表達(dá)水平均有不同程度提升;攻毒后LP/p SIP409-OmpAⅠ免疫組的保護(hù)率在65%以上,高于對照組的存活率。結(jié)果表明,應(yīng)用重組植物乳桿菌LP/p SIP409-OmpAⅠ免疫鯽魚能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng),為預(yù)防魚類維氏氣單胞菌感染的重組植物乳桿菌口服制劑的研發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to construct recombinant Lactobacillus plantarum OmpA 鈪,

本文編號:2477972

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