【摘要】：本研究對枯草芽孢桿菌中性蛋白酶的基因進行克隆,并在大腸桿菌中誘導表達。從枯草芽孢桿菌基因組克隆到編碼中性蛋白酶的全長基因,構建大腸桿菌原核表達載體pET30b,轉化大腸桿菌BL21得到重組工程菌。通過菌落PCR和酶切篩選驗證重組體。在25℃,110 r/min條件下,用IPTG誘導重組蛋白表達。表達蛋白用SDS-PAGE驗證,并對酶活力進行測定。測序結果表明克隆序列與NCBI上的登錄的序列同源性高達99%。SDS-PAGE結果表明誘導出的蛋白相對分子質量56.6 kD,酶活力達到39 U/mL。證明成功克隆得到枯草芽孢桿菌中性蛋白酶基因,并在大腸桿菌中得到高效表達。
[Abstract]:......
【作者單位】： 四川農(nóng)業(yè)大學生命科學學院;
【基金】：四川省科技廳支撐計劃項目(2013GZX0160)資助
【分類號】：Q78;Q936

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本文編號：2472876