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耐輻射異常球菌dlp基因缺失突變株構(gòu)建及其生物學(xué)功能研究

發(fā)布時(shí)間:2019-05-08 03:39
【摘要】:耐輻射異常球菌(Deinococcus radiodurans,DR)因其具有對(duì)非生物脅迫超強(qiáng)的抵抗能力而備受關(guān)注。旨在了解該菌親水蛋白Dlp在細(xì)胞耐受非生物脅迫中的作用,采用融合PCR和基因同源重組技術(shù),獲得了dlp基因缺失突變株Δdlp,對(duì)野生型DR及突變株Δdlp進(jìn)行非生物脅迫。結(jié)果表明,dlp的缺失導(dǎo)致DR細(xì)胞對(duì)高鹽和氧化脅迫敏感。體外檢測氧化脅迫條件下Dlp蛋白對(duì)蘋果酸脫氫酶(MDH)和乳酸脫氫酶(LDH)活性的保護(hù),結(jié)果顯示,Dlp蛋白的加入能緩解氧化脅迫條件下MDH、LDH酶活性的損失。由此表明,親水蛋白Dlp增強(qiáng)了耐輻射異常球菌對(duì)非生物脅迫的抗性,并能以類似分子伴侶的形式保護(hù)脅迫條件下酶的活性。
[Abstract]:Radiation-resistant abnormal cocci (Deinococcus radiodurans,DR) has attracted much attention because of its strong resistance to abiotic stress. In order to understand the role of hydrophilic protein Dlp in cell tolerance to abiotic stress, a mutant 螖 dlp, with deletion of dlp gene was obtained by fusion PCR and homologous recombination technique. The mutant 螖 DR and mutant strain 螖 dlp were subjected to abiotic stress on wild type DR and mutant strain 螖 dlp. The results showed that the absence of dlp resulted in the sensitivity of DR cells to high salt and oxidative stress. The protective effects of Dlp protein on the activity of malate dehydrogenase (MDH) and lactate dehydrogenase (LDH) under oxidative stress were measured in vitro. The results showed that the addition of Dlp protein could alleviate the loss of MDH,LDH activity under oxidative stress. The results showed that the hydrophilic protein Dlp enhanced the resistance to abiotic stress and protected the enzyme activity under stress conditions in the form of molecular chaperones.
【作者單位】: 西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所;四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;中國人民大學(xué)附屬中學(xué);
【基金】:國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(“973計(jì)劃”)(2013CB733903)
【分類號(hào)】:Q93

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本文編號(hào):2471588

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