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豬Btnl5基因的克

發(fā)布時間:2019-04-23 21:29
【摘要】:豬類嗜乳脂蛋白5(Btnl5)屬于嗜乳脂蛋白家族,其同源蛋白多為免疫調節(jié)蛋白,為探索Btnl5的序列特征及其功能,利用反轉錄PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速擴增(RACE)技術對Btnl5基因cDNA全長進行克隆及序列分析,采用定量PCR技術檢測Btnl5在豬不同組織中的表達豐度,利用報告基因法檢測Btnl5對NF-κB信號通路的影響。克隆得到Btnl5基因cDNA全長共3 334 bp,包含1 680 bp的開放讀碼框,可編碼長度為559個氨基酸殘基的多肽鏈。蛋白結構預測表明Btnl5編碼的蛋白含有信號肽、兩段免疫球蛋白結構域、跨膜結構域和B30.2結構域。定量PCR分析表明,在檢測的11個組織中,Btnl5只在空腸中具有較高水平的表達。報告基因檢測結果顯示Btnl5對NF-κB信號通路有一定的抑制作用。研究結果說明,Btnl5可能通過抑制NF-κB信號通路參與調節(jié)腸道免疫。
[Abstract]:Porcine lactalophil lipoprotein 5 (Btnl5) belongs to the family of lactophilic lipoproteins. Most of its homologous proteins are immunomodulatory proteins. In order to explore the sequence characteristics and function of Btnl5, The full length of Btnl5 gene cDNA was cloned and sequenced by reverse transcription PCR (RT-PCR) and rapid amplification of (RACE) at the end of cDNA. The expression abundance of Btnl5 in different tissues of pigs was detected by quantitative PCR. The effect of Btnl5 on NF- 魏 B signaling pathway was detected by reporter gene method. The full-length cDNA of the Btnl5 gene contained an open reading frame of 1,680 bp with a total length of 3 334 bp, which could encode a polypeptide chain with a length of 559 amino acid residues. Protein structure prediction showed that the protein encoded by Btnl5 contained signal peptide, two-segment immunoglobulin domain, transmembrane domain and B30.2 domain. Quantitative PCR analysis showed that only a high level of expression of Btnl5 was found in jejunum in the 11 detected tissues. The results of reporter gene analysis showed that Btnl5 could inhibit the NF- 魏 B signaling pathway to some extent. The results suggest that Btnl5 may be involved in the regulation of intestinal immunity by inhibiting NF- 魏 B signaling pathway.
【作者單位】: 中國科學院西北高原生物研究所高原生物適應與進化重點實驗室中國科學院西北高原生物研究所高原魚類進化與功能基因組學實驗室;中國科學院遺傳與發(fā)育生物學研究所遺傳資源中心;中國科學院大學;
【基金】:國家重點基礎研究發(fā)展計劃(“973”計劃)(2013CB835200)
【分類號】:Q78;S828

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本文編號:2463812

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