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紅麻過氧化物酶基因分離、過表達載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)化擬南芥分析

發(fā)布時間:2019-04-17 09:23
【摘要】:紅麻是一種以收獲韌皮纖維為主的經(jīng)濟作物,因其具有纖維產(chǎn)量高,抗逆境生長能力強等特點,在我國大部分地區(qū)都有種植。近年來,隨著其韌皮纖維在紡織工業(yè)中的應(yīng)用,紅麻越來越受到育種家的高度重視。其韌皮纖維中木質(zhì)素含量高低是限制其纖維品質(zhì)好壞的重要因素之一,過氧化物酶基因在不同品質(zhì)的木材中差異表達較為顯著。為研究該基因在紅麻(Hibiscus cannabinus L.)木質(zhì)素合成過程中的作用,通過紅麻轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫篩選到過氧化物酶(Peroxidase)基因的核心片段,利用Tail-PCR技術(shù)獲得了Peroxidase基因c DNA全長,命名為Hc POD。生物信息學分析表明:Hc POD基因編碼序列長952 bp,編碼316個氨基酸,相對分子量為33.9 k D,等電點為4.85。為進一步研究該基因的功能,本研究利用p CAMBIA1301載體作為骨架載體構(gòu)建了紅麻過氧化物酶基因過表達載體,利用花絮侵染法轉(zhuǎn)化擬南芥。通過對轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因植株體內(nèi)木質(zhì)素含量檢測后發(fā)現(xiàn),在擬南芥體內(nèi)過表達紅麻POD基因能顯著提高擬南芥的木質(zhì)素含量水平。研究結(jié)果為進一步分析該基因功能和了解紅麻木質(zhì)素合成的分子機制具有意義。
[Abstract]:Kenaf is a kind of cash crop which mainly harvest phloem fiber. It has been planted in most areas of our country because of its characteristics of high fiber yield and strong growth resistance to adversity. In recent years, with the application of bast fiber in textile industry, kenaf has been paid more and more attention by breeders. The lignin content in the phloem fiber is one of the important factors limiting the quality of the fiber, and the expression of peroxidase gene in wood with different quality is significant. In order to study the gene in kenaf (Hibiscus cannabinus L.) In the process of lignin synthesis, the core fragment of peroxidase (Peroxidase) gene was screened by kenaf transcript database. The full length of Peroxidase gene c DNA, named Hc POD., was obtained by Tail-PCR technique. Bioinformatics analysis showed that the coding sequence of: Hc POD gene was 952 bp, encoding 316 amino acids with a relative molecular weight of 33.9 KD and an isoelectric point of 4.85. In order to further study the function of the gene, the p-CAMBIA1301 vector was used as the skeleton vector to construct the over-expression vector of kenaf peroxidase gene, and the transgenic Arabidopsis thaliana was transformed into Arabidopsis thaliana by the method of floss infection. By detecting the lignin content in transgenic and non-transgenic plants, it was found that the overexpression of kenaf POD gene in Arabidopsis thaliana significantly increased the lignin content in Arabidopsis thaliana. The results are of significance for further analysis of the function of the gene and understanding of the molecular mechanism of lignin synthesis in kenaf.
【作者單位】: 上饒師范學院生命科學學院;中國農(nóng)業(yè)科學院麻類研究所;
【基金】:江西省自然科學基金(20142BAB204025) 江西省教育廳科學技術(shù)研究項目(GJJ151050) 農(nóng)業(yè)部麻類生物學與加工重點實驗室2016年度開放課題(201602) 上饒師范學院2014年博士科研啟動基金(001055)共同資助
【分類號】:Q943.2;S563.5

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本文編號:2459306

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