【摘要】：實驗采用cDNA末端快速擴增(RACE)和反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)對九孔鮑(Haliotis diversicolor supertexta)α-淀粉酶基因c DNA進行克隆,并分析該基因的組織表達及其與生長性狀的相關(guān)性。結(jié)果表明,九孔鮑α-淀粉酶基因c DNA全長為2 260 bp,其中開放閱讀框長度為2 088 bp,共編碼695個氨基酸。經(jīng)Singal P分析,α-淀粉酶多肽鏈中含有信號肽結(jié)構(gòu),且長度為18個氨基酸(MWAQYGIVSALLVLSASA),由該多肽鏈折疊成的三級結(jié)構(gòu)中含有domain A、domain C 2個結(jié)構(gòu)域,并且在domain A第28~第396氨基酸處存在催化中心。該基因在九孔鮑右側(cè)殼肌、腸、肝臟、胃、外套膜、吻、腹足7種組織中均有不同程度表達。其中在胃中表達量最高,表達量高達326.803;而在外套膜中表達量最低,表達量僅為0.35。經(jīng)ANOVA分析,消化組織與非消化組織間的α-淀粉酶基因表達量存在顯著差異(P0.05)。α-淀粉酶基因mRNA表達量與生長性狀呈顯著正相關(guān)(P0.05)。
[Abstract]:The (Haliotis diversicolor supertexta) 偽-amylase gene cDNA of Haliotis abalone was cloned by rapid amplification of (RACE) and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) at the end of cDNA. The tissue expression of the gene and its correlation with growth traits were analyzed. The results showed that the full length of 偽-amylase gene c DNA was 2 260 bp, and the length of open reading frame (ORF) was 2088 bp, which encodes a total of 695 amino acids. Singal P analysis showed that the 偽-amylase polypeptide chain contained signal peptide structure, and the three-order structure of 18 amino acid-length (MWAQYGIVSALLVLSASA), folded from the peptide chain contained domain A and domain C 2 domains. And there are catalytic centers at the sites of 28 ~ 396 amino acids in domain A. The gene was expressed in the right shell muscle, intestine, liver, stomach, envelope, kiss and gastropods of Haliotis abalone. The highest expression level was found in the stomach, which was up to 326.803, while the expression level in the outer membrane was the lowest, which was only 0.35%. The expression of 偽-amylase gene was significantly different between digestive tissues and non-digested tissues by ANOVA analysis (P0.05), and the expression of 偽-amylase gene mRNA was positively correlated with growth traits (P0.05).
【作者單位】： 廣東海洋大學水產(chǎn)學院;
【基金】：廣東省省級科技計劃項目(2015A020209196) 廣東省海洋漁業(yè)科技與產(chǎn)業(yè)發(fā)展專項科技攻關(guān)與研發(fā)項目(A201408A04) 深圳市未來產(chǎn)業(yè)項目(SWCYL20150331010028)
【分類號】：S917.4

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本文編號：2458196