發(fā)布時(shí)間：2019-03-08 12:38

【摘要】：CBF/DREB是一類(lèi)植物中特有的轉(zhuǎn)錄因子,在植物抵抗逆境脅迫過(guò)程中發(fā)揮重要功能。本研究從陸地棉(Gossypium hirsutum L.)Coker 312中克隆獲得1個(gè)棉花CBF/DREB基因,命名為Gh CBF2,該基因編碼一個(gè)由216個(gè)氨基酸組成的CBF蛋白。序列分析結(jié)果顯示,Gh CBF2與其他植物的CBF蛋白類(lèi)似,含有AP2轉(zhuǎn)錄因子典型的保守結(jié)構(gòu)域。干旱或高鹽脅迫處理明顯增加了Gh CBF2基因的表達(dá)量。亞細(xì)胞定位分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)Gh CBF2定位在細(xì)胞核中。將Gh CBF2基因構(gòu)建到由35S啟動(dòng)子調(diào)控的植物表達(dá)載體p MD上并轉(zhuǎn)化擬南芥(Arabidopsis thaliana L.),結(jié)果表明,在干旱和鹽脅迫條件下,過(guò)量表達(dá)Gh CBF2基因擬南芥的成活率顯著高于野生型,并且游離脯氨酸和可溶性糖含量也高于野生型,說(shuō)明轉(zhuǎn)Gh CBF2基因提高了擬南芥的耐鹽抗旱能力。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法分析脅迫相關(guān)標(biāo)記基因COR15A、RD29A和ERD6的表達(dá)情況,結(jié)果顯示轉(zhuǎn)基因株系中的表達(dá)量顯著高于野生型,說(shuō)明Gh CBF2參與調(diào)控?cái)M南芥干旱和鹽脅迫相關(guān)基因的表達(dá)。
[Abstract]:CBF/DREB is a special transcription factor in plants, which plays an important role in the process of plant resistance to adversity stress. In this study, a cotton CBF/DREB gene was cloned from upland cotton (Gossypium hirsutum L.) Coker 312 and named Gh CBF2, which encodes a CBF protein consisting of 216 amino acids. Sequence analysis showed that Gh CBF2 was similar to other plants in CBF protein and contained a typical conserved domain of AP2 transcription factor. Drought or high salt stress significantly increased the expression of Gh CBF2 gene. Subcellular localization analysis showed that Gh CBF2 was localized in the nucleus. The Gh CBF2 gene was constructed into the plant expression vector p MD regulated by 35s promoter and transformed into Arabidopsis thaliana (Arabidopsis thaliana L.),. The results showed that the survival rate of Arabidopsis thaliana overexpressing Gh CBF2 gene under drought and salt stress was significantly higher than that of wild type Arabidopsis thaliana. The contents of free proline and soluble sugar in Arabidopsis thaliana were also higher than those in wild type, which indicated that the transgenic Gh CBF2 gene improved the salt tolerance and drought resistance of Arabidopsis thaliana. Real-time fluorescence quantitative PCR was used to analyze the expression of stress-related marker genes COR15A,RD29A and ERD6. The results showed that the expression of COR15A,RD29A and ERD6 in transgenic lines was significantly higher than that in wild-type lines. These results suggest that Gh CBF2 is involved in regulating the expression of drought and salt stress related genes in Arabidopsis thaliana.
【作者單位】： 喀什大學(xué)生命與地理科學(xué)學(xué)院新疆維吾爾自治區(qū)教育廳葉爾羌綠洲生態(tài)與生物資源研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;新疆師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;華中師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：新疆維吾爾自治區(qū)高�？蒲杏�(jì)劃科學(xué)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(XJEDU2014I037) 喀什大學(xué)高層次人才科研啟動(dòng)經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目(GCC16ZK-002)~~
【分類(lèi)號(hào)】：Q943.2

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