【摘要】：目的:采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)原發(fā)性肝癌組織中DNA修復(fù)基因XPC、ERCC1和XPF mRNA表達(dá)水平,并分析各基因mRNA表達(dá)水平與肝癌臨床病理特征及術(shù)后復(fù)發(fā)時(shí)間之間的關(guān)系,初步探討三者在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)意義及疾病進(jìn)展、預(yù)后中所起的作用。方法:選取廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院2007年3月至2013年12月期間符合入組條件的73例原發(fā)性肝癌病例,并選取21例距手術(shù)切緣大于1cm的癌旁組織為對(duì)照,所有患者術(shù)前術(shù)后均未接受放化療、介入治療及分子靶向治療等。提取所有標(biāo)本總RNA進(jìn)行電泳質(zhì)控檢測(cè),應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)肝癌組織和癌旁組織中XPC、ERCC1和XPF的mRNA表達(dá)水平,運(yùn)用Western Blot(W-B)方法檢測(cè)隨機(jī)選取的10例肝癌組織和對(duì)應(yīng)癌旁組織中三個(gè)基因的蛋白表達(dá)狀況。分析各基因mRNA表達(dá)水平在癌組織和癌旁組織的差異及與肝癌臨床病理特征、術(shù)后復(fù)發(fā)時(shí)間的關(guān)系。應(yīng)用SPSS 17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。均以α =0.05作為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),P0. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.電泳結(jié)果顯示,入組標(biāo)本總RNA均有不同程度的降解,但仍不影響后續(xù)的RT-PCR檢測(cè)。2. XPC、ERCC1和XPF mRNA擴(kuò)增曲線呈明顯“S”型,指數(shù)增長(zhǎng)期曲線基本平行,且溶解曲線呈單峰型,說(shuō)明目的基因擴(kuò)增效率好、擴(kuò)增產(chǎn)物特異性高。3. XPC和XPFmRNA在癌組織中的表達(dá)水平顯著低于癌旁組織(P0.05) ; ERCC1mRNA在癌組織中的表達(dá)水平低于癌旁組織,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。XPC、ERCC1和XPF在癌組織和癌旁組織中均有蛋白水平的表達(dá)。4. XPC mRNA在合并肝硬化患者中的表達(dá)水平較未合并肝硬化患者顯著增高(P0.05)。但在其他不同的臨床病理特征分組中,XPCmRNA的表達(dá)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0. 05)。XPCmRNA在術(shù)后復(fù)發(fā)時(shí)間≤6m組、6m且≤12m組、12m且≤18m組、18m且≤24m組及24m組間表達(dá)水平的總體差異具有統(tǒng)計(jì)意義(p0.05),其中在12m且≤18m組表達(dá)最高,在≤6m組表達(dá)最低。XPC mRNA在術(shù)后復(fù)發(fā)時(shí)間≤12m組、 12m且≤24m組及24m組之間的表達(dá)存在顯著差異(P0.05),其中在12m且≤24m組表達(dá)水平最高,而在≤12m組表達(dá)水平最低。5. ERCC1 mRNA在被膜侵犯組的表達(dá)水平較無(wú)被膜侵犯組顯著降低(P0.05)。但在其他不同的臨床病理特征和術(shù)后不同時(shí)間復(fù)發(fā)分組之間,ERCC1 mRNA表達(dá)無(wú)顯著差異（P0.05)。6. XPF mRNA表達(dá)水平與術(shù)前ALT水平、腫瘤大小、被膜侵犯、TNM分期及術(shù)后復(fù)發(fā)時(shí)間相關(guān)。術(shù)前ALT水平≤2. 5倍正常值患者XPF mRNA表達(dá)水平較2. 5倍正常值患者低。腫瘤最大徑≤5cm的患者XPF mRNA表達(dá)水平較腫瘤最大徑5cm患者低。被膜侵犯的患者XPF mRNA表達(dá)水平較無(wú)被膜侵犯的患者低。TNM分期中,Ⅱ期患者XPF mRNA表達(dá)水平最低,Ⅲ期患者XPF mRNA表達(dá)水平最高,Ⅰ期患者XPF mRNA表達(dá)水平介于兩者之間,差異均有統(tǒng)計(jì)意義(P0. 05)。XPF mRNA表達(dá)水平在術(shù)后復(fù)發(fā)時(shí)間≤6m組、6m且≤12m組、12m且≤18m組、18m且≤24m及24m組之間具有顯著差異(P0. 05),其中在≤6m組,XPF mRNA表達(dá)水平最低,隨著術(shù)后時(shí)間的延長(zhǎng),表達(dá)水平逐漸升高,在12m且≤18m組表達(dá)最高,之后XPF mRNA表達(dá)水平就逐漸下降。7. XPC與ERCC1、XPC與XPF及ERCC1與XPF在肝癌組織中的mRNA表達(dá)水平均存在正性相關(guān)。XPC mRNA表達(dá)水平越低,ERCC1 mRNA的表達(dá)水平也越低;XPC mRNA的表達(dá)水平越低,XPF mRNA的表達(dá)水平也越低;ERCC1 mRNA表達(dá)水平越低,XPF mRNA的表達(dá)水平也越低。8. XPC高表達(dá)、ERCC1高表達(dá)且XPF高表達(dá)組術(shù)后2年內(nèi)復(fù)發(fā)率與XPC低表達(dá)、ERCC1低表達(dá)且XPF低表達(dá)組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0. 05)。XPC高表達(dá)、ERCC1高表達(dá)且XPF低表達(dá)組、XPC高表達(dá)、ERCC1低表達(dá)且XPF高表達(dá)組和XPC低表達(dá)、ERCC1高表達(dá)且XPF高表達(dá)組術(shù)后2年內(nèi)復(fù)發(fā)率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:1. .XPC和XPF mRNA在肝癌組織和癌旁組織中的表達(dá)水平具有顯著差異,癌組織中XPC和XPF mRNA表達(dá)水平顯著低于癌旁組織。ERCC1 mRNA在肝癌組織的表達(dá)處于低水平狀態(tài)。這三個(gè)基因在蛋白質(zhì)水平均有表達(dá)。2. XPC mRNA表達(dá)水平與肝硬化密切相關(guān),合并肝硬化,XPC mRNA表達(dá)水平就越高。ERCC1 mRNA表達(dá)水平與被膜侵犯有關(guān),被膜侵犯,ERCC1 mRNA表達(dá)水平就越低。XPF mRNA表達(dá)水平與術(shù)前ALT水平、腫瘤大小、被膜侵犯及TNM分期相關(guān)。XPC和XPF mRNA表達(dá)水平可能與術(shù)后復(fù)發(fā)時(shí)間相關(guān)。3. XPC與ERCC1、XPC與XPF及ERCC1與XPF在肝癌組織中的mRNA表達(dá)水平均呈正性相關(guān),XPC、ERCC1和XPFmRNA在肝癌組織中的表達(dá)降低具有一致性。4. XPC、ERCC1和XPFmRNA聯(lián)合表達(dá)的狀態(tài)可能與患者術(shù)后2年內(nèi)復(fù)發(fā)有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R735.7

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王琳;陳俊民;邢雪花;王海霞;孫達(dá)統(tǒng);楊生輝;黃琰菁;盛莉;邱純;陳鄧林;;進(jìn)展期胃癌ERCC1表達(dá)與含鉑方案化療療效相關(guān)性Meta分析[J];中華腫瘤防治雜志;2015年06期

2 徐小博;楚慧麗;仲晨;王俊;王寶成;畢經(jīng)旺;;非小細(xì)胞肺癌組織中EGFR基因突變與ERCC1mRNA表達(dá)的關(guān)系[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;2014年06期

3 顧術(shù)東;茅國(guó)新;;晚期結(jié)腸癌組織中ERCC1和BRCA1的表達(dá)與奧沙利鉑方案化療療效及預(yù)后的關(guān)系[J];腫瘤防治研究;2014年10期

4 李紫燕;張翼;張士虎;;胃癌組織中ERCC1基因?qū)崟r(shí)熒光定量PCR表達(dá)及臨床意義[J];中國(guó)衛(wèi)生產(chǎn)業(yè);2014年28期

5 趙國(guó)華;吳杰;范中寶;劉信;張睿;許國(guó)巖;;ERCC1和TS對(duì)奧沙利鉑和5-Fu聯(lián)合化療的胃癌患者化療療效的Meta分析[J];實(shí)用癌癥雜志;2014年06期

6 顧術(shù)東;張曙;劉艷;劉凡;茅國(guó)新;;ERCC1蛋白表達(dá)與結(jié)腸癌FOLFOX方案化療療效及預(yù)后相關(guān)性分析[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年36期

7 于艷麗;熊艷杰;田志華;宋志超;韓萍;;上皮性卵巢癌DNA-PKcs和ERCC1表達(dá)與預(yù)后相關(guān)因素分析[J];中國(guó)臨床新醫(yī)學(xué);2013年06期

8 劉慶云;孫秀華;劉芳;李曼;趙金波;張陽(yáng);;ERCC1在胃癌組織中的表達(dá)及其對(duì)含鉑類(lèi)輔助化療療效的影響[J];大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年02期

9 潘冬香;仇小強(qiáng);劉順;譚超;黃慧;;廣西人群DNA修復(fù)途徑部分基因多態(tài)性與肝癌臨床病理特征的關(guān)聯(lián)研究[J];中華疾病控制雜志;2013年03期

10 秦瓊;楊林;王金萬(wàn);;DNA錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)缺陷在結(jié)腸癌中的研究進(jìn)展[J];癌癥進(jìn)展;2012年06期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 郭巖松;ERCC1在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及其意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 張喬;DNA修復(fù)蛋白XPF影響腎癌細(xì)胞順鉑耐藥的作用與機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2014年

3 鄭霄雁;修復(fù)基因ERCC1多態(tài)性與肝癌易感性的關(guān)系[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

，

本文編號(hào)：2435576