【摘要】：利用分子克隆的方法,對一種源于菠蘿泛菌的內(nèi)切葡聚糖酶(即β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶)基因進行克隆、原核表達,利用Ni-NTA吸附柱對表達的重組內(nèi)切葡聚糖酶進行純化,分析重組酶的活性。研究結(jié)果顯示,此重組內(nèi)切葡聚糖酶含1個1 002 bp的開放閱讀框,編碼334個氨基酸序列,重組酶在大腸桿菌細胞中的表達量占可溶性蛋白的50%以上,經(jīng)過純化獲得了純度高于95%的內(nèi)切葡聚糖酶蛋白,酶活力可以達到2 245 U/m L。
[Abstract]:By molecular cloning, an endoglucanase gene (尾 -1m4-endoglucanase) from pantobacillus pineapple was cloned and expressed in prokaryotic expression. The recombinant endoglucanase was purified by Ni-NTA adsorption column. The activity of recombinant enzyme was analyzed. The results showed that the recombinant endoglucanase contained an open reading frame of 1 002 bp and encoded 334 amino acid sequences. The expression of recombinant glucanase in Escherichia coli cells accounted for more than 50% of the soluble protein. After purification, endoglucanase protein with purity of more than 95% was obtained, and the enzyme activity could reach 2 245 U / m L.
【作者單位】： 徐州工程學(xué)院食品工程學(xué)院;
【基金】：江蘇省博士后基金項目(1302041B) 江蘇省食品資源開發(fā)與質(zhì)量安全重點建設(shè)實驗室開放基金項目(SPKF201411) 徐州市科技計劃項目(KC15N0011) 徐州工程學(xué)院校級科研課題(XKY2013108);徐州工程學(xué)院大學(xué)生創(chuàng)新項目(XCX2015118)
【分類號】：Q78;Q55

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本文編號：2415704