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RNPC1基因對乳腺癌細胞MCF-7阿霉素藥物敏感性的影響

發(fā)布時間:2019-01-21 07:03
【摘要】:目的 :研究RNPC1對乳腺癌細胞MCF-7阿霉素藥物敏感性的影響。方法 :在MCF-7細胞中使用慢病毒轉染法,設敲除(sh RNPC1)組和過表達RNPC1組、敲除對照(SCR)組和過表達對照(NC)組。用實時熒光定量PCR和Western blot法檢測各組MCF-7細胞中RNPC1的m RNA和蛋白水平。以不同濃度的阿霉素處理各組MCF-7細胞,CCK-8法檢測各組細胞生長抑制率。阿霉素處理各組MCF-7細胞后,用流式細胞術檢測各組細胞凋亡率,Western blot法檢測各組細胞中調亡相關蛋白的表達。結果:sh RNPC1組RNPC1 m RNA和蛋白相對表達量均低于SCR組,過表達RNPC1組RNPC1 m RNA及蛋白相對表達量均高于NC組(P0.05)。阿霉素處理各組MCF-7細胞后,sh RNPC1組IC50明顯于低于SCR組(P0.05),過表達組IC50明顯高于NC組(P0.05)。阿霉素處理各組MCF-7細胞24 h后,發(fā)現(xiàn)sh RNPC1組凋亡率明顯高于SCR組;過表達RNPC1組凋亡率顯著低于NC組(P0.05)。阿霉素處理各組MCF-7細胞24 h后,sh RNPC1組抑凋亡蛋白BCL-XL、BCL-2的表達低于SCR組,促凋亡蛋白BIM和BID的表達高于SCR組;過表達RNPC1組抑凋亡蛋白BCL-CL、BCL-2的表達高于NC組,促凋亡蛋白BIM和BID的表達低于NC組。結論:RNPC1能降低乳腺癌細胞MCF-7對阿霉素的敏感性,其機制與抗細胞凋亡有關。
[Abstract]:Objective: to study the effect of RNPC1 on the drug sensitivity of MCF-7 cells. Methods: lentivirus transfection was used in MCF-7 cells. The cells were divided into knockout (sh RNPC1) group and over-expressed RNPC1 group, knockout control (SCR) group and overexpression control (NC) group. The m RNA and protein levels of RNPC1 in MCF-7 cells were detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot. MCF-7 cells were treated with different concentrations of adriamycin, and the growth inhibition rate of each group was detected by CCK-8 assay. After MCF-7 cells were treated with adriamycin, apoptosis rate was detected by flow cytometry and the expression of apoptosis related protein was detected by, Western blot method. Results: the relative expression of RNPC1 m RNA and protein in sh RNPC1 group was lower than that in SCR group, and the relative expression of RNPC1 m RNA and protein in RNPC1 group was higher than that in NC group (P0.05). After MCF-7 cells were treated with adriamycin, IC50 in sh RNPC1 group was significantly lower than that in SCR group (P0.05), and IC50 in overexpression group was significantly higher than that in NC group (P0.05). After treated with adriamycin for 24 h, the apoptosis rate of sh RNPC1 group was significantly higher than that of SCR group, and the apoptosis rate of overexpression RNPC1 group was significantly lower than that of NC group (P0.05). After treated with adriamycin for 24 h, the expression of anti-apoptotic protein BCL-XL,BCL-2 in sh RNPC1 group was lower than that in SCR group, and the expression of pro-apoptotic protein BIM and BID in sh RNPC1 group was higher than that in SCR group. The expression of anti-apoptotic protein BCL-CL,BCL-2 in RNPC1 group was higher than that in NC group, and the expression of BIM and BID in NC group was lower than that in NC group. Conclusion: RNPC1 can reduce the sensitivity of MCF-7 to adriamycin, and its mechanism is related to anti-apoptosis.
【作者單位】: 南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院乳腺外科;
【基金】:國家自然科學基金(81572595)
【分類號】:R737.9

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