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熊果酸對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)及對(duì)PPAR-γ的基因及蛋白表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2019-01-13 08:17
【摘要】:目的:觀察不同質(zhì)量濃度熊果酸(UA)對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞促進(jìn)膽固醇流出的影響及過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-γ(PPAR-γ)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá),探討可能作用機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)RAW264.7巨噬細(xì)胞,用20 mg·L~(-1)的氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育48 h誘導(dǎo)成泡沫細(xì)胞,采用油紅O染色,光鏡下鑒定泡沫細(xì)胞形態(tài)變化,液體閃爍計(jì)數(shù)儀檢測(cè)膽固醇的流出率,并用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time PCR)及酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)測(cè)定PPAR-γ的基因及蛋白表達(dá)。結(jié)果:巨噬細(xì)胞經(jīng)ox-LDL誘48 h后轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞,與空白組比較,10,15,20,25 mg·L~(-1)質(zhì)量濃度UA干預(yù)組泡沫細(xì)胞的膽固醇流出率上升(P0.01);10,15,20,25 mg·L~(-1)質(zhì)量濃度UA干預(yù)組泡沫細(xì)胞內(nèi)PPAR-γ的基因表達(dá)上調(diào)(P0.01),在一定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)呈劑量依賴(lài)性;10,15,20,25 mg·L~(-1)質(zhì)量濃度UA干預(yù)組泡沫細(xì)胞內(nèi)PPAR-γ的蛋白表達(dá)增加(P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:經(jīng)20 mg·L~(-1)ox-LDL的誘導(dǎo)后,巨噬細(xì)胞分化為泡沫細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)大量增加,UA促進(jìn)巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出,可能與上調(diào)細(xì)胞內(nèi)PPAR-γ的表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to observe the effect of ursolic acid (UA) on cholesterol efflux of RAW264.7 macrophage derived foam cells and the expression of peroxisome proliferator activated receptor-緯 (PPAR- 緯) transporter. To explore the possible mechanism of action. Methods: RAW264.7 macrophages were cultured in vitro and incubated with 20 mg L-1 oxidized low density lipoprotein (ox-LDL) for 48 h to induce foam cells. Oil red O staining was used to identify the morphological changes of foam cells under light microscope. The efflux rate of cholesterol was measured by liquid scintillation counter, and the gene and protein expression of PPAR- 緯 was determined by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (Real-time PCR) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results: macrophages were induced into foam cells by ox-LDL for 48 h. Compared with the blank group, the cholesterol efflux rate of foam cells increased in the UA intervention group (P0.01). The gene expression of PPAR- 緯 in foam cells was up-regulated in UA intervention group (P0.01) in a dose-dependent manner. The protein expression of PPAR- 緯 in foam cells was increased in UA intervention group (P0.01), and the difference was statistically significant. Conclusion: after 20 mg L ~ (-1) ox-LDL induction, macrophages differentiated into foam cells, lipid increased significantly, and UA promoted cholesterol efflux in macrophages, which may be related to up-regulation of PPAR- 緯 expression in macrophages.
【作者單位】: 昆明學(xué)院醫(yī)學(xué)院;昆明市第一人民醫(yī)院;
【基金】:云南省教育廳科學(xué)研究基金項(xiàng)目(2014Y387) 云南省科技廳應(yīng)用基礎(chǔ)研究項(xiàng)目(2016FD109)
【分類(lèi)號(hào)】:R285

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本文編號(hào):2408263

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