【摘要】：本研究從糙皮側耳中克隆了乙醛脫氫酶基因PoALDH1(Gen Bank登錄號為KT026035)和其全長c DNA序列。長為2 016bp的PoALDH1序列編碼478個氨基酸,分子量約為52k Da,氨基酸序列中含有乙醛脫氫酶保守的谷氨酸活性位點和半胱氨酸殘基活性位點。PoALDH1基因在大腸桿菌中表達后顯示,重組菌株的乙醛脫氫酶比活力為0.58U/mg,且重組菌株的乙醛耐受性顯著高于對照菌株。實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR)分析PoALDH1基因在糙皮側耳不同發(fā)育時期的表達結果顯示,PoALDH1基因在原基期的表達量約為雙核菌絲期的5倍。PoALDH1基因在原基發(fā)育起始階段經光照及溫差刺激后均上調表達。當糙皮側耳菌絲暴露在不同濃度的氯化鈉及甘露醇的條件下時,菌絲生長均受到抑制且PoALDH1基因的表達量均高于對照。研究結果將為進一步從分子水平揭示糙皮側耳的抗逆機制以及食用菌的發(fā)育奠定一定基礎。
[Abstract]:In this study, acetaldehyde dehydrogenase gene PoALDH1 (Gen Bank accession number was KT026035 and its full-length c DNA sequence was cloned from Pleurotus strigella. The PoALDH1 sequence with a length of 2 016bp encodes 478amino acids. The molecular weight of the amino acid sequence is about 52k Da, which contains the conserved glutamate active site and cysteine residue active site of acetaldehyde dehydrogenase. The PoALDH1 gene is expressed in E. coli. The specific activity of acetaldehyde dehydrogenase of the recombinant strain was 0.58 U / mg, and the acetaldehyde tolerance of the recombinant strain was significantly higher than that of the control strain. The expression of PoALDH1 gene in different developmental stages of Pleurotus strigella was analyzed by real-time fluorescence quantitative PCR (quantitative real-time PCR. The expression of PoALDH1 gene in the primordial stage was about 5 times higher than that in the binaryotic mycelium stage, and the expression of PoALDH1 gene was up-regulated during the initial stage of the primordium development after being stimulated by light and temperature difference. When the hyphae of Pleurotus strigella was exposed to different concentrations of sodium chloride and mannitol, the hyphal growth was inhibited and the expression of PoALDH1 gene was higher than that of the control. The results will lay a foundation for further understanding the stress resistance mechanism of Pleurotus strigella and the development of edible fungi at molecular level.
【作者單位】： 河南農業(yè)大學生命科學學院;
【基金】：現代農業(yè)產業(yè)技術體系建設專項(CARS-24) 河南省重點科技攻關項目(162102110091)~~
【分類號】：S646

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本文編號：2402488