發(fā)布時(shí)間：2018-12-26 14:28

【摘要】：腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)性惡性腫瘤,據(jù)國內(nèi)流行病學(xué)統(tǒng)計(jì),其發(fā)病率在35.26%-60.96%(平均44.69%)。其發(fā)生于神經(jīng)外胚層,由于其發(fā)病機(jī)制不清楚,臨床表現(xiàn)多樣性,通常被認(rèn)為是一種致命的人類惡性腫瘤,其呈浸潤性生長,治療效果差,復(fù)發(fā)率高,預(yù)后差。WHO(2007)將腦膠質(zhì)瘤劃分為Ⅰ~Ⅳ級:1.低級別膠質(zhì)瘤(WHOⅠ級和Ⅱ級)常見于兒童和年輕人,2.高級別膠質(zhì)瘤(WHOⅢ級和Ⅳ級)常見于中老年人。膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)最具破壞性,盡管現(xiàn)階段的腫瘤檢測以及放化療等治療手段都有了很大的進(jìn)步,GBM患者的中位生存期仍然很短,約14個(gè)月。這就促使我們不得去尋找更多更有效的治療辦法。近年來分子生物學(xué)的快速發(fā)展推動(dòng)了腦膠質(zhì)瘤治療的進(jìn)步,使得分子靶向治療越來越成為腦膠質(zhì)瘤治療研究的熱門領(lǐng)域,可以預(yù)言隨著越來越多的靶向藥物被發(fā)現(xiàn),腦膠質(zhì)瘤的治愈率和中位生存率將可能獲得提高。因此,分析腦膠質(zhì)瘤的生物學(xué)特性,從基因水平探索腦膠質(zhì)瘤相關(guān)發(fā)病機(jī)制成為研究的焦點(diǎn)。B細(xì)胞易位基因(B-cell translocation gene,BTG)屬人類BTG/TOB的家族,該家族至少包括6種不同成員,即BTG1、BTG2/PC3/Tis21、BTG3/Ana、BTG4/PC3B、TOB1和TOB2,參與細(xì)胞增殖及生長周期的調(diào)控,并介導(dǎo)多種細(xì)胞分化。研究表明BTG1基因?qū)?xì)胞增殖起負(fù)調(diào)控作用,其表達(dá)隨著細(xì)胞周期的變化而變化,在細(xì)胞周期的G0/G1期BTG1表達(dá)最高,隨后下降。BTG1在癌組織中表達(dá)下降,如卵巢癌、食管癌、胃癌、肝細(xì)胞癌、甲狀腺癌、乳腺癌及肺癌等,且其過表達(dá)抑制多種癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移、浸潤和凋亡,如卵巢癌等。以上研究證實(shí)BTG1是一種新的抑癌基因。雖然這些研究提示BTG1具備腫瘤抑制基因的特征,BTG1基因是否是腦膠質(zhì)瘤相關(guān)抑制基因?在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)狀況如何?目前國內(nèi)外尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。人第10號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源的基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome 10,PTEN)是位于人類10號染色體的一個(gè)抑癌基因,在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著至關(guān)重要的抑制作用,它在多種腫瘤如子宮內(nèi)膜癌,前列腺癌,腎細(xì)胞癌,結(jié)腸癌及肺癌等中存在雜合缺失或突變。有研究證明PTEN具有抑制腦膠質(zhì)瘤生長的作用并有少數(shù)研究試圖通過它尋找新的治療靶點(diǎn)。本研究采用免疫組化EnVision法和Western blot方法檢測并分析BTG1和PTEN蛋白在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系,以期為腦膠質(zhì)瘤的臨床治療找到新的基因靶點(diǎn)。材料和方法1.收集鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2013年12月至2016年4月行腫瘤全切的80例膠質(zhì)瘤組織標(biāo)本,并選取25例顱腦減壓所得正常腦組織作對照。2.應(yīng)用免疫組織化學(xué)(EnVision法)染色方法分別檢測各級別膠質(zhì)瘤組織和正常腦組織中BTG1和PTEN蛋白的表達(dá)情況。3.隨機(jī)選取4例新鮮的腦膠質(zhì)瘤組織及正常腦組織,應(yīng)用Western blot檢測其中BTG1和PTEN蛋白的表達(dá)情況。4.應(yīng)用SPSS17.0版軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。多組之間數(shù)據(jù)比較采用Kruskal Wallis Test分析;相關(guān)分析采用Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)和Logistic回歸分析。所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均至少重復(fù)3次,以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果免疫組化結(jié)果:1.BTG1陽性表達(dá)主要定位于細(xì)胞漿,呈淺黃色、黃褐色或棕黃色染色。BTG1在正常腦組織中的陽性表達(dá)率較高,表達(dá)率為96.0%(24/25),表達(dá)強(qiáng)度為較強(qiáng),而在腦膠質(zhì)瘤的陽性表達(dá)率降低,表達(dá)率為73.8%(59/80),表達(dá)強(qiáng)度減弱。二者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.PTEN陽性表達(dá)主要定位于細(xì)胞漿,呈淺黃色、黃褐色或棕黃色染色。PTEN在正常組織中的陽性表達(dá)率較高,表達(dá)率為100%(25/25),表達(dá)強(qiáng)度為較強(qiáng),而在膠質(zhì)瘤的陽性表達(dá)率降低,表達(dá)率為77.5%(62/80),表達(dá)強(qiáng)度減弱。二者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.BTG1和PTEN蛋白的表達(dá)與膠質(zhì)瘤臨床病理參數(shù)的關(guān)系BTG1和PTEN蛋白的表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤組織學(xué)WHO分級的關(guān)系的分析結(jié)果顯示腦膠質(zhì)瘤組織中二者的表達(dá)與腫瘤組織學(xué)WHO分級呈負(fù)相關(guān)(P0.05),隨著腦膠質(zhì)瘤的級別增高,蛋白表達(dá)率降低且表達(dá)強(qiáng)度下降。各級膠質(zhì)瘤及正常腦組織之間BTG1和PTEN表達(dá)分別兩兩比較(Kruskal Wallis Test分析)顯示,Ⅰ級膠質(zhì)瘤與正常腦組織相比無顯著差異(P0.05),Ⅲ級和Ⅳ級相比無顯著差異(P0.05);其余各組之間相比均有顯著差異(P0.05)。BTG1和PTEN之間的相關(guān)分析(Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn))顯示二者表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系;Logistic回歸分析顯示BTG1和PTEN蛋白在20歲以上患者比20歲以下患者的表達(dá)率及表達(dá)強(qiáng)度下降(P0.05);但二者的表達(dá)與腫瘤直徑及患者性別無關(guān)(P0.05)。Western blot結(jié)果:腦膠質(zhì)瘤和正常腦組織中BTG1和PTEN蛋白的表達(dá)分析結(jié)果顯示,膠質(zhì)瘤組織中BTG1和PTEN蛋白的表達(dá)低于正常腦組織,與免疫組織化學(xué)的結(jié)果一致。結(jié)論1腦膠質(zhì)瘤組織比正常組織BTG1和PTEN蛋白的表達(dá)陽性率明顯降低,提示其表達(dá)水平與腫瘤組織學(xué)分級呈負(fù)相關(guān),提示BTG1在腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生和發(fā)展中可能起著重要的生物學(xué)作用。2 BTG1和PTEN蛋白表達(dá)的檢查有助于膠質(zhì)瘤診斷的分級,二者有可能成為新的基因治療靶點(diǎn)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.41

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 Chen Liu;Guangbing Li;Rongrong Chen;Xiaobo Yang;Xue Zhao;Haitao Zhao;;A novel PTEN gene promoter mutation and untypical Cowden syndrome[J];Chinese Journal of Cancer Research;2013年03期

2 王虎;浦佩玉;王廣秀;董倫;康春生;李捷;王春艷;焦德讓;;腦膠質(zhì)瘤中PTEN、MMP2與MMP9表達(dá)的研究[J];中國神經(jīng)精神疾病雜志;2005年06期

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本文編號：2392250