【摘要】：海島棉作為新疆特有的資源,其優(yōu)良的纖維品質(zhì)和商業(yè)價值是其他作物不可替代的。本研究以K222、新海25、新海30為受體,利用農(nóng)桿菌介導技術(shù)導入Bt基因,通過PCR檢測、Southern雜交、Bt-Cry1Ab/1Ac試紙條檢測和抗蟲性鑒定,證明Bt基因整合到海島棉基因組中并得到表達。在分子檢測基礎(chǔ)上,對轉(zhuǎn)Bt基因海島棉品系的農(nóng)藝性狀、產(chǎn)量性狀和纖維品質(zhì)進行考察,結(jié)果表明：(1)PCR檢測結(jié)果得出9個轉(zhuǎn)Bt基因品系都含有目的基因,并且陽性率都在90%以上；Southern雜交結(jié)果可以看出7個轉(zhuǎn)Bt基因品系出現(xiàn)了雜交條帶,3個品系為單拷貝,3個品系為雙拷貝,1個品系三拷貝。表明Bt基因已經(jīng)成功整合到海島棉基因組中。(2)用Bt免疫試紙條檢測轉(zhuǎn)Bt基因品系及對照,轉(zhuǎn)Bt基因品系的試紙條上出現(xiàn)兩條紫紅色條帶,而對照的試紙條上只出現(xiàn)一條紫紅色條帶,K2-ZKC66的陽性率達到了90%。(3)抗蟲性鑒定結(jié)果表明轉(zhuǎn)Bt基因品系的葉片危害較輕,葉片較為完整,對照葉片危害較重,葉片不完整,7個轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉幼蟲校正死亡率都在60%以上。(4)Bt基因的導入對9個海島棉品系的農(nóng)藝性狀、產(chǎn)量性狀和纖維品質(zhì)產(chǎn)生不同程度的變化,當受體為K222時,轉(zhuǎn)基因品系農(nóng)藝性狀(除果枝數(shù)外)與對照之間差異極顯著(P0.01)；當受體為XH25和XH30時,轉(zhuǎn)基因品系農(nóng)藝性狀與對照之間差異不顯著。(5)9個轉(zhuǎn)基因品系之間株高、始節(jié)高、始節(jié)數(shù)和鈴數(shù)差異極顯著(P0.01),有效果枝數(shù)和有效鈴數(shù)差異顯著(P0.05)。(6)9個轉(zhuǎn)基因品系的產(chǎn)量性狀與對照之間差異不顯著；農(nóng)藝性狀與產(chǎn)量呈顯著相關(guān)。(7)綜合考慮9個轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉在各方面的表現(xiàn),篩選出K2-ZKC66,K2-ZKC31,K2-ZKC70三個表現(xiàn)優(yōu)良的新品系。
[Abstract]:As a unique resource in Xinjiang, island cotton has excellent fiber quality and commercial value that can not be replaced by other crops. In this study, using K222, Xinhai 25 and Xinhai 30 as receptors, the Bt gene was introduced by Agrobacterium tumefaciens. The gene was detected by PCR, Southern hybridization, Bt-Cry1Ab/1Ac strip detection and insecticidal identification. The results showed that Bt gene was integrated into the genome and expressed in sea island cotton. On the basis of molecular detection, the agronomic characters, yield characters and fiber quality of island cotton lines with Bt gene were investigated. The results showed that: (1) the results of PCR analysis showed that all 9 lines with Bt gene had target genes. The positive rate was above 90%. The results of Southern hybridization showed that there were hybridization bands in 7 lines with Bt gene, 3 lines with single copy, 3 lines with double copy and 1 strain with three copies. The results showed that the Bt gene had been successfully integrated into the genome of island cotton. (2) two purplish red bands were found on the test strip of the transgenic Bt gene strain, and the Bt gene lines and the control were detected by Bt immunological test strip. However, there was only one purplish red band on the strip of the control, and the positive rate of K2-ZKC66 reached 90%. (3) the results of insect-resistance identification showed that the leaf damage of the transgenic strain with Bt gene was lighter, the leaf of the transgenic strain was relatively intact, and the damage of the control leaf was more serious. The corrected larval mortality of 7 transgenic cotton lines with Bt gene was above 60%. (4) the agronomic characters, yield characters and fiber quality of 9 island cotton lines were changed in different degree by introducing Bt gene. When the receptor was K222, the agronomic characters of transgenic lines (except the number of fruit branches) were significantly different from those of the control (P0.01). When the receptors were XH25 and XH30, there was no significant difference between the agronomic characters of the transgenic lines and the control. (5) the plant height, the number of initial nodes and the number of bolls were significantly different among the 9 transgenic lines (P0.01). There was no significant difference in the number of effective branches and effective bolls (P0.05). (6) between the yield characters of 9 transgenic lines and the control. Agronomic traits were significantly correlated with yield. (7) considering the performance of 9 transgenic cotton lines with Bt gene in various aspects, three new lines, K2-ZKC66, K2-ZKC31and K2-ZKC70, were selected.
【學位授予單位】：新疆農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S562

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本文編號：2387147