【摘要】：維生素D受體(VDR)是一種核激素受體,在介導(dǎo)維生素D調(diào)節(jié)機(jī)體鈣-磷代謝、參與骨形成和礦化以及骨代謝等方面發(fā)揮重要作用。本實(shí)驗(yàn)克隆獲得馬氏珠母貝維生素D受體(Pm-VDR)編碼區(qū),檢測其在不同組織中的表達(dá)模式,并分析維生素D3(VD3)刺激后Pm-VDR和馬氏珠母貝L-型電壓依賴性鈣通道(PCaβ)基因的表達(dá),探究Pm-VDR在馬氏珠母貝生物礦化過程中的作用。結(jié)果顯示:Pm-VDR開放式閱讀框(ORF)為1407bp,編碼468個(gè)氨基酸;相對(duì)分子量為53871.17kD,等電點(diǎn)為6.19;脂溶性系數(shù)為68.14,總平均親水性為-0.70,屬于親水性蛋白。Pm-VDR具有由兩個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)組成的DNA結(jié)合域和一個(gè)激素受體的配體結(jié)合域。多序列比對(duì)結(jié)果顯示Pm-VDR在物種之間具有較高的保守性,與長牡蠣同源性最高。qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn)Pm-VDR在馬氏珠母貝肝胰腺和鰓中表達(dá)量顯著高于其他組織,其中肝胰腺的表達(dá)量最高。在0.2%、2%、20%濃度的VD3刺激12h后,Pm-VDR和PCaβ基因在鰓中表達(dá)量均顯著上調(diào)(p0.05),上調(diào)的最低濃度分別為2%和0.2%。綜上所述,Pm-VDR可能通過介導(dǎo)VD3調(diào)控PCaβ基因的表達(dá)參與馬氏珠母貝鰓組織對(duì)Ca2+的吸收過程,從而調(diào)控貝體的生物礦化。
[Abstract]:Vitamin D receptor (VDR) is a nuclear hormone receptor, which plays an important role in mediating vitamin D to regulate the metabolism of calcium and phosphorus, taking part in bone formation, mineralization and bone metabolism. In this study, the coding region of vitamin D receptor (Pm-VDR) of Pinctada martensii was obtained and its expression patterns in different tissues were detected. The expression of Pm-VDR and L- type voltage-dependent calcium channel (PCa 尾) gene induced by vitamin D _ 3 (VD3) was analyzed to explore the role of Pm-VDR in the biological mineralization process of mother shellfish. The results showed that the Pm-VDR open reading frame (ORF) was 1407bp, encoding 468 amino acids, the relative molecular weight was 53871.17kD, the isoelectric point was 6.19; The liposolubility coefficient was 68.14, and the total average hydrophilicity was -0.70, which belongs to hydrophilic protein. Pm-VDR has a DNA binding domain composed of two zinc finger structures and a ligand binding domain of a hormone receptor. The results of multiple sequence alignment showed that Pm-VDR was highly conserved among species and had the highest homology with oyster. QRT-PCR analysis showed that the expression of Pm-VDR in hepatopancreas and gills of Pinctada martensii was significantly higher than that in other tissues. The expression of hepatopancreas was the highest. After being stimulated with 20% VD3 for 12 h, the expression of Pm-VDR and PCa 尾 genes in Gill was significantly up-regulated (p0.05), and the lowest concentrations were 2% and 0.2%, respectively. In conclusion, Pm-VDR may mediate VD3 regulation of PCa 尾 gene expression and participate in the process of Ca2 absorption in the Gill tissue of Pinctada martensii, thus regulating the biological mineralization of shellfish.
【作者單位】： 廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院;廣東省珍珠養(yǎng)殖與加工工程技術(shù)研究中心;
【基金】：廣東省普通高校重大科研項(xiàng)目培育計(jì)劃“珍珠貝良種培育與新型育種模式”(2014GKXM049) 廣東省海洋漁業(yè)與產(chǎn)業(yè)發(fā)展專項(xiàng)“馬氏珠母貝優(yōu)質(zhì)抗逆選系苗種規(guī)�；庇c示范養(yǎng)殖”(Z2014009)和“馬氏珠母貝海選1號(hào)苗種規(guī)模化繁育與示范養(yǎng)殖”(B201601-Z10)共同資助
【分類號(hào)】：Q78;S917.4

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本文編號(hào)：2381034