【摘要】：研究背景:pik3ca基因是乳腺癌中比較常見的突變基因,突變后的pik3ca基因會引起PI3K/AKT/mTOR通路的激活,隨后導致乳腺癌細胞的快速增殖、侵襲和轉移。pik3cp基因突變可能與乳腺癌患者預后相關。本論文研究pik3ca基因的突變與云南地區(qū)乳腺癌發(fā)生發(fā)展及預后的關系,將為云南地區(qū)乳腺癌患者的個性化治療方法提供理論依據。研究目的:揭示pik3cp基因的突變與乳腺癌發(fā)生發(fā)展及預后的相關性。研究方法:應用DNA測序的方法檢測云南地區(qū)乳腺癌患者pik3ca基因突變,應用免疫組化實驗和蛋白免疫印跡實驗探究pik3ca相關的信號通路蛋白表達水平。綜合文獻進行meta分析pik3ca基因突變與乳腺癌預后的相關性。研究結果:①meta分析結果表明pik3ca基因突變與曲妥珠單抗靶向治療Her2擴增型乳腺癌患者的無疾病進展生存期PFS(HR=1.52,95%CI:1.04-2.21,p=0.029)相關。pik3ca基因突變與曲妥珠單抗靶向治療Her2擴增型乳腺癌患者的總生存期OS(HR=1.31,95%CI:0.63-2.72,p=0.470)無顯著相關性。同時,pik3ca基因的突變與曲妥珠單抗靶向治療Her2擴增型乳腺癌患者客觀緩解率OR(OR=0.67,95%CI:0.32-1.40,p=0.292)無顯著相關性。通過對TCGA數據庫里的數據進行分析,其結果表明pik3ca基因的突變與乳腺癌患者的生存期沒有相關性(p0.05),pik3ca基因的表達情況與乳腺癌患者的生存率也沒有相關性(p=0.360330.05);②本研究所收集的乳腺癌患者以Her2擴增型為主,占46%,其余LuminalA型、Luminal B型和Basal-like型比例分別為6%、8%和40%;③乳腺癌患者pik3ca 9號外顯子的突變率為8%,其中E545K突變率為6%,S553fs*7突變率為4%。pik3ca基因9號外顯子的突變與乳腺癌分子分型(p=0.946),淋巴結轉移(p=0.142)以及PI3K(p110a)表達情況(p=0.416)沒有顯著相關性,但與乳腺癌的惡性情況存在顯著相關性(p=0.0050.05);④PI3K(p110a)、PR、ER、Her2、Ki67、P53、Bcl2、MMP9 蛋白的表達情況與乳腺癌中淋巴結轉移及乳腺癌惡性程度無顯著相關性(p值均大于0.05);⑤本論文中用到的五種乳腺癌細胞除了 MDA-MB-231細胞PI3K/AKT/mTOR通路沒有激活外,其余四種細胞的PI3K/AKT/mTOR通路均存在一定水平的激活,其中Her2擴增型的SK-BR-3細胞PI3K/AKT/mTOR通路激活狀況最顯著。五種乳腺癌細胞mTOR下游信號p-P70S6、p-4EBP1(T37/46)和 p-4EBP1(ser65)激活狀態(tài)不一樣,其中以 MCF-7 的 p-P70S6的表達量最顯著,T47D細胞的p-4EBP1(T37/46)和p-4EBP1(ser65)的表達量最顯著。另外,五種乳腺癌細胞的MEK/ERK通路均存在一定程度的激活,其中MDA-MB-231、MDA-MB-468和SK-BR-3細胞的MEK/ERK通路的激活程度明顯高于其余三種細胞。結論:雖然TGCA數據庫中的數據顯示pik3ca的突變情況以及pik3a的表達量分別與乳腺癌患者的預后生存期沒有顯著相關性,但是meta分析結果表明pik3ca基因的突變提示了曲妥珠單抗靶向治療的Her2擴增型乳腺癌患者較差的無疾病進展生存期。因此pik3ca基因突變與乳腺癌預后存在一定相關性,但仍然有待于進一步擴大樣本進行驗證與探究。本研究中所收集的乳腺癌樣本以Her2擴增型為主,抑癌基因p53、pten陽性表達率低,細胞侵襲轉移相關MMP9蛋白以及激活細胞增殖通路的PI3K(p110a)蛋白的陽性表達率較高。乳腺癌樣本中存在pik3ca基因9號外顯子的E545K和s553fs*7突變。pik3ca基因9號外顯子的突變與乳腺癌分子分型,淋巴結轉移情況以及PI3K(p110a)蛋白的表達量之間無顯著相關性,但是與乳腺癌的惡性情況有顯著相關性。MCF-7,T47D,MDA-MB-468,SK-BR-3細胞均出現PI3K/AKT/mTOR通路的激活。另外Basal-like型MDA-MB-231 和MDA-MB-468細胞以及Her2擴增型的SK-BR-3細胞較其他類型細胞均出現MEK/ERK通路的激活提示調控MEK/ERK通路的激活狀態(tài)可作為控制Basal-like型細胞以及Her2擴增型細胞增殖的關鍵。
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【學位授予單位】：昆明理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R737.9

【參考文獻】

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1 姚青,駱軍容,陳江浩,張聚良,袁時芳,凌瑞,王嶺;MAPK信號通路相關信號轉導分子在人乳腺癌細胞系中的表達及活化水平[J];細胞與分子免疫學雜志;2004年03期

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本文編號：2377857