發(fā)布時間：2018-11-26 17:35

【摘要】：本研究選取誘導(dǎo)型重組菌E.coli DPD2794、E.coli TV1061及組成型重組菌E.coliTop10-P.luxCDABE、E.coli DH5α-P.luxCDABE為作用菌株,通過山梨酸納米微粒對重組發(fā)光菌生長、發(fā)光情況影響,及場發(fā)射掃描電鏡(SEM)成像結(jié)果,對山梨酸納米微粒的抑菌活性進行評價,對其作用機理進行了初步探究。試驗得到以下結(jié)論:1.誘導(dǎo)型重組菌E.coli DPD2794、E.coli TV1061最適發(fā)光溫度分別為27℃、28℃,對數(shù)中后期達到最大發(fā)光強度255、422,最大耐受發(fā)光的溫度為33℃、32℃。E.coli DPD2794在pH 6時菌體生長良好、發(fā)光強度最大。山梨酸納米微粒對誘導(dǎo)型重組菌E.coli DPD2794、E.coli TV1061的最小抑菌濃度(MIC)分別為60μg/mL和64μg/mL,對組成型重組菌E.coli Top10-P.luxCDABE和E.coli DH5α-P.luxCDABE的MIC分別為52μg/mL和40μg/mL。2.加入的山梨酸納米微粒,對兩株組成型重組菌,隨著濃度增加,最大發(fā)光強度顯著降低(P0.05);加入各菌株MIC濃度的山梨酸納米微粒,菌體生長被完全抑制,不產(chǎn)生發(fā)光。對于誘導(dǎo)型重組發(fā)光菌,E.coli DPD2794僅對有毒化合物的基因毒性產(chǎn)生響應(yīng),高濃度山梨酸納米微粒抑制菌體發(fā)光;當濃度≤3.75μg/mL(即1/16 MIC)對菌體發(fā)光有促進作用。E.coli TV1061能夠?qū)Χ喾N引起代謝變化的有毒化合物產(chǎn)生響應(yīng)。高濃度(≥1/4 MIC)處理菌體不發(fā)光,低濃度抑制菌體發(fā)光,山梨酸納米微粒對E.coli TV1061的發(fā)光無促進作用。根據(jù)兩株誘導(dǎo)型重組發(fā)光菌的發(fā)光機制,推測山梨酸納米微粒是通過對菌體細胞造成DNA損傷進行抑菌作用。誘導(dǎo)型重組菌和組成型重組菌經(jīng)山梨酸納米微粒處理后的場發(fā)射掃描電鏡(SEM)成像顯示,細胞膜被破壞,菌體破裂,胞內(nèi)物質(zhì)溶出,部分破損菌體有山梨酸納米微粒附著。根據(jù)SEM成像結(jié)果及殼聚糖納米微粒、山梨酸的抑菌作用機理,推斷山梨酸納米微粒的作用機制為利用殼聚糖納米微粒的粘膜粘附性,使山梨酸納米微粒與膜蛋白結(jié)合,改變膜蛋白的結(jié)構(gòu)進而影響菌體生理結(jié)構(gòu);山梨酸納米微粒釋放的部分山梨酸分子進入菌體內(nèi)部,與微生物中酶的巰基結(jié)合,破壞菌體酶系結(jié)構(gòu),從而抑制微生物生長繁殖。
[Abstract]:In this study, the recombinant bacteria E.coli DPD2794,E.coli TV1061 and E. coli DH5 偽-P.luxCDABE, E. coli, E. coli and E. coli, respectively, were selected as the acting strains. The growth and luminescence of the recombinant luminescent bacteria were influenced by sorbic acid nanoparticles. The bacteriostatic activity of sorbic acid nanoparticles was evaluated by field emission scanning electron microscopy (SEM) imaging and the mechanism of its action was preliminarily explored. The results are as follows: 1. The optimum luminescence temperature of inducible recombinant strain E.coli DPD2794,E.coli TV1061 was 27 鈩，

本文編號：2359190