【摘要】：目的明確多肽bCAT抑制白念珠菌生物被膜形成能力,并探索其與黏附基因HWP1表達(dá)的關(guān)系。方法標(biāo)準(zhǔn)菌株白念珠菌ATCC10231和臨床菌株作為研究對(duì)象,XTT法檢測(cè)其生物被膜形成能力,bCAT抗浮游白念珠菌的MIC值以CLSI-M27-A3方法確定,XTT法及菌落計(jì)數(shù)檢測(cè)bCAT抑制生物被膜形成作用,并計(jì)算代謝活性確定抑制50%生物被膜形成的MIC(BIC_(50)),bCAT減少白念珠菌的黏附作用經(jīng)倒置顯微鏡下觀察及菌落計(jì)數(shù)法檢測(cè),并采用RT-PCR通過(guò)2~(-ΔΔCt)法計(jì)算HWP1的表達(dá)量。統(tǒng)計(jì)方法為單因素方差分析,組內(nèi)比較采用Dunnett T3檢驗(yàn)。結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)菌株及臨床菌株均有較強(qiáng)生物被膜形成能力。bCAT抗浮游狀態(tài)的白念珠菌MIC值為40~80μmol/L,BIC_(50)為80~160μmol/L;并且bCAT能減少白念珠菌的黏附作用,空白對(duì)照組菌落計(jì)數(shù)為(27 822.22±2 472.74)cfu,bCAT濃度為160、80、40、20、10μmol/L時(shí)的菌落個(gè)數(shù)分別為(5 355.55±1 264.03)cfu、(11 377.78±2 232.58)cfu、(17 488.89±1 136.27)cfu、(22 377.78±3 521.99)cfu、(26 044.44±1 329.57)cfu。組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=147.018,P=0.001),組內(nèi)比較發(fā)現(xiàn)160、80、40μmol/L處理組與不含bCAT時(shí)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。RT-PCR發(fā)現(xiàn)160μmol/L處理組HWP1相對(duì)表達(dá)量為空白對(duì)照組的12.24%。結(jié)論 bCAT能有效抑制白念珠菌生物被膜形成,其機(jī)制可能與降低HWP1基因的表達(dá)從而減少白念珠菌的黏附有關(guān)。具有一定的臨床前景。
[Abstract]:Objective to investigate the inhibitory effect of polypeptide bCAT on biofilm formation of Candida albicans and its relationship with the expression of adhesion gene HWP1. Methods the biofilm forming ability of Candida albicans ATCC10231 and clinical strains was detected by XTT method. The MIC value of bCAT against Candida albicans was determined by CLSI-M27-A3 method. XTT and colony count were used to detect the inhibitory effect of bCAT on biofilm formation, and the metabolic activity was calculated to determine the inhibitory effect of MIC (BIC_ (50),) on biofilm formation by 50% biofilm. The effect of bCAT on the adhesion of Candida albicans was observed under inverted microscope and detected by colony counting method. The expression of HWP1 was calculated by RT-PCR through 2- 螖 Ct method. The statistical method was single factor ANOVA and Dunnett T3 test was used for intra-group comparison. Results both the standard strain and clinical strain had strong biofilm forming ability. The MIC of Candida albicans with bCAT resistance to plankton was 400.80 渭 mol/L,BIC_ (50), 80,160 渭 mol/L;. BCAT could reduce the adhesion of Candida albicans. When the colony count of blank control group was (27 822.22 鹵2 472.74) cfu,bCAT, the number of colony was (5 355.55 鹵1 264.03) cfu, (11 377.78 鹵2 232.58) cfu, at the concentration of 160 mol/L. (17 488.89 鹵1 136.27) cfu, (22 377.78 鹵3 521.99) cfu, (26 044.44 鹵1 329.57) cfu. The difference between groups was statistically significant (FF147.018P0. 001). There was significant difference between 160 渭 mol/L and 40 渭 mol/L groups (P0.05). The relative expression of HWP1 in 160 渭 mol/L treated group was 12.24% of that in the blank control group (P0.05). Conclusion bCAT can effectively inhibit the formation of biofilm in Candida albicans, and its mechanism may be related to the reduction of the expression of HWP1 gene and the decrease of adhesion of Candida albicans. It has certain clinical prospect.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院肝膽外科;
【基金】：重慶市衛(wèi)計(jì)委重點(diǎn)項(xiàng)目(2016ZDXM001)
【分類號(hào)】：R379.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2351739