【摘要】：白蟻(Blattodea:Isoptera)是利用纖維素類物質(zhì)最為成功的昆蟲。臺灣乳白蟻(Coptotermes formosanus Shiraki)是重要的木食性害蟲,在我國華南地區(qū)為害尤為嚴(yán)重,針對臺灣乳白蟻纖維素酶系統(tǒng)的酶抑制劑研發(fā)是潛在的臺灣乳白蟻治理方法。本研究通過研究內(nèi)源纖維素酶內(nèi)切-p-1,4-葡聚糖酶CJEG基因dsRNA、葡萄糖酸內(nèi)酯(GDL)、纖維二糖(CLB)、殼寡糖(COS)、殼聚糖(CTS)、曲酸(KA)、氧化苦參堿(OM)、單寧酸(TA)、槲皮素(QT)和氟蟲脲等物質(zhì)對臺灣乳白蟻的濾紙酶活性(FPA)、內(nèi)切-β-1,4-葡聚糖酶(EG)、p-葡萄糖苷酶(BG)、纖維二糖水解酶(CBH)活性的抑制作用,獲得了如下主要結(jié)果：1、臺灣乳白蟻內(nèi)切-p-1,4-葡聚糖酶基因RNAi用150ng/頭、75ng/頭的dsCfEG對臺灣乳白蟻進(jìn)行注射處理,于24 h、48 h、72 h測定CfEG基因表達(dá)水平均出現(xiàn)了顯著性下調(diào)(P0.05),纖維素酶的活性均顯著降低(P0.05),注射150ng/頭dsCfEG處理組的抑制效果優(yōu)于注射75ng/頭dsCfEG處理組。用1 ug/cm2、ug/cm2、5 ug/cm2的dsCfEG處理濾紙后喂食臺灣乳白蟻,于1 d、3 d、5 d、7 d測定CfEG基因表達(dá)水平均出現(xiàn)了顯著性下調(diào)(P0.05),纖維素酶的活性均顯著降低(P0.05),喂食2ug/cm2 dsCfEG處理組的抑制效果優(yōu)于喂食1 ug/cm2和5ug/cm2dsC/EG處理組。2、對臺灣乳白蟻纖維素酶活性有抑制作用的化合物篩選用1%GDL、CLB、COS、KA、OM、TA溶液處理濾紙后喂食臺灣乳白蟻,于6h、12 h、1d、3d、5d、7d測定纖維素酶活性,結(jié)果表明：6種化合物有效抑制臺灣乳白蟻纖維素酶的活性。6種化合物對FPA的抑制效果為：KA≥COS≥OM≥CLB≥GDLTA；對EG活性的抑制效果為：KA≥COS≥OM≥CLB≥GDL≥TA;對BG活性的抑制效果為：GDL≥OM≥KA≥COS≥CLB TA;對CBH活性的抑制效果為：COS≥ KA≥OM≥GDL≥CLB≥TA。用GDL、CLB、COS、 CTS、KA、OM、TA、QT與纖維素粉混合后喂食臺灣乳白蟻,于1d、3d、5d、7d測定纖維素酶活性,結(jié)果表明：8種化合物有效抑制臺灣乳白蟻纖維素酶的活性。8種化合物對FPA的抑制效果為：KA≥COS≥OM≥CLB≥GDL≥ TA≥QT≥CTS;對EG活性的抑制效果為：KA COS OM CLB≥GDL CTS≥TA≥QT；對BG活性的抑制效果為：GDL≥OM≥ KA COS TA≥CLB≥CTS≥ QT;對CBH活性的抑制效果為：KA≥OM≥COS CLB≥CTS GDL≥TA≥QT。3、對臺灣乳白蟻纖維素酶活性的聯(lián)合抑制作用用ddH2O (1)、dsCJEG (2)、dsCJEG+COS (3)、dsCfEG+KA (4)、dsCfEG+氟蟲脲(5)處理濾紙后喂食臺灣乳白蟻,于1 d、3 d、5 d、7 d測定纖維素酶活性。結(jié)果表明：(2)、(3)、(4)、(5)的FPA和EG活性均顯著降低(p0.05).dsRNA與幾種化合物聯(lián)合喂食對FPA和EG活性的抑制效果均為：(5)(4)(3)(2)。用ddH2O(1)、氟蟲脲(2)、氟蟲脲+COS(3)、氟蟲脲+KA(4)、氟蟲脲+COS+KA(5).氟蟲脲+COS+KA+dsCfEG(6)處理濾紙后喂食臺灣乳白蟻,于1d、3 d、5 d、7 d測定纖維素酶活性。結(jié)果表明：(2)、(3)、(4)、(5)、(6)的FPA和EG活性均顯著降低(P0.05).dsRNA與幾種化合物聯(lián)合喂食對FPA的抑制效果為：(6)≥(5)≥(4)(3)(2)；對EG活性的抑制效果為：(6)≥(5)(4)≥(3)(2)。綜上所述,本研究合成的dsCfEG及葡萄糖酸內(nèi)酯、纖維二糖、殼寡糖、殼聚糖、曲酸、氧化苦參堿、單寧酸、槲皮素均對臺灣乳白蟻纖維素消化具有一定的抑制作用,可進(jìn)一步研制白蟻抑食劑及消化干擾劑,應(yīng)用于白蟻的防治。
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【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S433

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1 谷岱霏;臺灣乳白蟻EG基因RNAi及其在纖維素酶活抑制中的應(yīng)用[D];東北林業(yè)大學(xué);2016年

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本文編號：2348413