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MiRNA-520e對(duì)HeLa細(xì)胞FOXL2基因的靶向調(diào)控作用及細(xì)胞遷移增殖的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-11-19 10:01
【摘要】:目的探討miRNA-520e對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞FOXL2基因的調(diào)控作用及對(duì)細(xì)胞遷移、增殖的影響。方法應(yīng)用生物信息學(xué)分析軟件(Target Scan Human 7.1)預(yù)測(cè)miRNA-520e可能結(jié)合于FOXL2 mRNA 3'UTR端,以HeLa細(xì)胞作為試驗(yàn)研究對(duì)象,將細(xì)胞隨機(jī)分為陰性對(duì)照組(加入無(wú)關(guān)序列NC Fam mimics)、正常對(duì)照組(不加任何干預(yù))、miRNA-520e組(加入miRNA-520e mimics)。運(yùn)用脂質(zhì)體法通過(guò)Lipofectamine 3000 Reagent將各miRNA mimics轉(zhuǎn)染各組HeLa細(xì)胞,48 h后通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR及Western blotting法檢測(cè)FOXL2 mRNA及蛋白表達(dá);轉(zhuǎn)染24 h后采用細(xì)胞劃痕試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力,使用ACEA xCELLigence RTCA DP細(xì)胞分析儀檢測(cè)細(xì)胞增殖能力。結(jié)果 miRNA-520e組HeLa細(xì)胞FOXL2 mRNA和蛋白的表達(dá)量較正常對(duì)照組及陰性對(duì)照組降低,且miRNA-520e組細(xì)胞的遷移和增殖能力較正常對(duì)照組及陰性對(duì)照組增強(qiáng)(P均0.05)。結(jié)論 miRNA-520e可抑制HeLa細(xì)胞FOXL2 mRNA和蛋白的表達(dá),促進(jìn)細(xì)胞遷移和增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of miRNA-520e on the regulation of FOXL2 gene and cell migration and proliferation in human cervical cancer HeLa cells. Methods the bioinformatics software (Target Scan Human 7.1 was used to predict the possible binding of miRNA-520e to the FOXL2 mRNA 3'UTR terminal. HeLa cells were randomly divided into negative control group (adding the unrelated sequence NC Fam mimics),). Normal control group (without any intervention), miRNA-520e group (add miRNA-520e mimics).) The miRNA mimics was transfected into HeLa cells by Lipofectamine 3000 Reagent with liposome method. After 48 h, the expression of FOXL2 mRNA and protein was detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western blotting. After 24 hours of transfection, the cell migration ability was detected by cell scratch test, and the cell proliferation ability was detected by ACEA xCELLigence RTCA DP cell analyzer. Results the expression of FOXL2 mRNA and protein in HeLa cells in miRNA-520e group was lower than that in normal control group and negative control group, and the cell migration and proliferation ability in miRNA-520e group was higher than that in normal control group and negative control group (P 0.05). Conclusion miRNA-520e can inhibit the expression of FOXL2 mRNA and protein in HeLa cells and promote cell migration and proliferation.
【作者單位】: 濰坊醫(yī)學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81272122)
【分類號(hào)】:R737.33

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本文編號(hào):2341954

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