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甘蔗新基因ShHXT4克隆亞細胞定位及表達特征

發(fā)布時間:2018-11-18 12:47
【摘要】:以甘蔗品種新臺糖22號為材料,利用同源克隆技術(shù)從甘蔗中分離出ShHXT4基因,以GADPH基因為內(nèi)參,并采用實時定量RT-PCR分析該基因在甘蔗組織中的表達,同時構(gòu)建亞細胞定位載體,通過農(nóng)桿菌侵染洋蔥表皮的方法對ShHXT4編碼的蛋白進行亞細胞定位。研究分析發(fā)現(xiàn)該基因CDS序列長度為1 632 bp,編碼540個氨基酸,蛋白的等電點(p I)為9.16,理論分子量為56.64 k D,命名為ShHXT4,基因編碼多肽鏈中包含信號肽和12次跨膜結(jié)構(gòu)域,且亞細胞定位于質(zhì)膜,編碼一種轉(zhuǎn)運蛋白。洋蔥表皮瞬時表達該基因GFP融合載體表明,ShHXT4定位于細胞膜,組織表達分析顯示ShHXT4基因在根、莖和葉中均有表達,葉片中的表達量較高,暗示ShHXT4基因可能在甘蔗葉片糖分轉(zhuǎn)運過程中扮演重要角色,研究結(jié)果為進一步研究ShHXT4基因的功能及應用提供幫助。
[Abstract]:The ShHXT4 gene was isolated from sugarcane by homologous cloning technique and the GADPH gene was used as internal reference. The expression of the gene in sugarcane tissue was analyzed by real-time quantitative RT-PCR. At the same time, the subcellular localization vector was constructed, and the protein encoded by ShHXT4 was located by Agrobacterium tumefaciens infecting onion epidermis. The CDS sequence length of the gene was 1 632 bp, encoding 540 amino acids, the isoelectric point (p I) of the protein was 9.16, and the theoretical molecular weight was 56.64 KD, which was named ShHXT4,. The gene encoding polypeptide chain contains signal peptides and 12 transmembrane domains, and the subcells are located on the plasma membrane and encode a transporter. The GFP fusion vector for the transient expression of the gene in onion epidermis showed that ShHXT4 was located on the cell membrane. Tissue expression analysis showed that the ShHXT4 gene was expressed in root, stem and leaf, and the expression level in leaf was higher. It is suggested that ShHXT4 gene may play an important role in sugar transport in sugarcane leaves, and the results may be helpful to further study the function and application of ShHXT4 gene.
【作者單位】: 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院熱帶生物技術(shù)研究所中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院甘蔗研究中心農(nóng)業(yè)部熱帶作物生物學與遺傳資源利用重點實驗室;
【基金】:海南省自然科學基金(20163124) 中央級公益科研院所基本業(yè)務費(ITBB140503) 國家自然科學基金項目(No.31371687)共同資助
【分類號】:S566.1

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本文編號:2340072

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