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棉花光合基因GhRCAα啟動子的克隆及活性分析

發(fā)布時間:2018-11-16 16:33
【摘要】:為了克隆棉花Rubisco活化酶基因(RCA)啟動子,研究其表達調(diào)控的分子機制,以百棉1號為材料,對GhRCAα啟動子區(qū)2 000 bp的片段進行克隆、順式作用元件分析以及活性分析,結(jié)果表明,許多重要的順式作用元件包括響應(yīng)于光、生物鐘、逆境脅迫、植物激素以及其他的基本順式作用元件特異地存在于GhRCAα啟動子區(qū);進一步對GhRCAα進行表達特性分析發(fā)現(xiàn),該基因在光合作用進行的主要位置葉片中表達量最高,在其他組織表達量很低,其表達具有組織特異性,這與該啟動子區(qū)存在許多光響應(yīng)及組織特異性表達相關(guān)元件的結(jié)果相一致;將克隆的GhRCAα啟動子片段以煙草葉片為受體材料進行瞬時表達分析表明,GhRCAα啟動子可以驅(qū)動GUS基因的表達,表明克隆的啟動子片段具有驅(qū)動目標(biāo)基因表達的活性�?寺〉腉hRCAα啟動子可能是一種組織特異型啟動子,有望用于植物的遺傳轉(zhuǎn)化,進而更好地調(diào)控重要基因的特異性表達。
[Abstract]:In order to clone the (RCA) promoter of cotton Rubisco activase gene and study the molecular mechanism of its expression regulation, the 2 000 bp fragment of GhRCA 偽 promoter was cloned, the cis acting element analysis and the activity analysis were carried out using Baimian 1 as the material. The results show that many important cis-acting elements, including the response to light, biological clock, stress, plant hormones and other basic cis-acting elements, are specifically present in the GhRCA 偽 promoter region. Further analysis of the expression characteristics of GhRCA 偽 showed that the expression of GhRCA 偽 was the highest in the main position of photosynthesis, but very low in other tissues, and its expression was tissue specific. This is consistent with the results of many light responses and tissue-specific expression of related elements in the promoter region. The transient expression analysis of the cloned GhRCA 偽 promoter using tobacco leaves as the receptor material showed that the GhRCA 偽 promoter could drive the expression of GUS gene, indicating that the cloned promoter fragment had the activity of driving the expression of the target gene. The cloned GhRCA 偽 promoter may be a tissue-specific promoter, which is expected to be used in the genetic transformation of plants and to regulate the specific expression of important genes.
【作者單位】: 河南科技學(xué)院生命科技學(xué)院現(xiàn)代生物育種河南省協(xié)同創(chuàng)新中心;河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(31601347) 河南省高等學(xué)校重點科研計劃項目(15A210001) 河南科技學(xué)院大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練計劃(2016CX006)
【分類號】:S562

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