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結(jié)縷草ZjCSD基因的克隆及表達(dá)分析

發(fā)布時間:2018-11-10 19:56
【摘要】:銅鋅超氧化物歧化酶是植物響應(yīng)逆境脅迫過程中的關(guān)鍵酶,其含量和活性與植物抗逆性密切相關(guān)。本研究以結(jié)縷草cDNA為模板,利用同源克隆法,從結(jié)縷草轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫中克隆獲得了結(jié)縷草ZjCSD基因,該基因編碼一個含有152個氨基酸的蛋白質(zhì)。生物信息學(xué)分析結(jié)果顯示:ZjCSD基因編碼蛋白為穩(wěn)定的、親水的、酸性、非分泌脂溶蛋白,定位于細(xì)胞質(zhì)中,含有CSD蛋白家族特有的保守結(jié)構(gòu)域,具有典型的Cu~(2+)和Zn~(2+)結(jié)合位點;與小米、玉米等禾本科植物具有較高的同源性,進(jìn)化關(guān)系較近。采用實時熒光定量PCR研究該基因在不同組織中、不同脅迫處理下的表達(dá)模式,結(jié)果表明,ZjCSD基因在根、莖、葉中都有表達(dá),葉中表達(dá)量最高;干旱脅迫(30%PEG)、鹽脅迫(150mmol/L NaCl)和Cd~(2+)脅迫(200mg/L Cd~(2+))均能誘導(dǎo)ZjCSD基因表達(dá)量上調(diào),Pb~(2+)脅迫(1g/L Pb~(2+))誘導(dǎo)ZjCSD基因表達(dá)量下調(diào)。故推測結(jié)縷草ZjCSD基因在結(jié)縷草應(yīng)對干旱、鹽和重金屬脅迫的過程中發(fā)揮作用。
[Abstract]:Copper-zinc superoxide dismutase (SOD) is a key enzyme in plant response to stress, and its content and activity are closely related to plant stress resistance. In this study, the ZjCSD gene of Zoysia japonica was cloned from Zoysia japonica transcriptional database by homologous cloning using cDNA as template. The gene encodes a protein containing 152 amino acids. Bioinformatics analysis showed that the protein encoded by ZjCSD gene was stable, hydrophilic, acidic and non-secreted adiponectin, located in the cytoplasm and containing the conserved domain of CSD protein family. There are typical Cu~ (2) and Zn~ (2) binding sites. It has high homology with millet, corn and other gramineous plants, and its evolutionary relationship is close. Real-time fluorescence quantitative PCR was used to study the expression patterns of the gene in different tissues and under different stresses. The results showed that ZjCSD gene was expressed in roots, stems and leaves, and the highest expression was found in leaves. Drought stress (30%PEG), salt stress (150mmol/L NaCl) and Cd~ (2) stress (200mg/L Cd~ (2) could induce the up-regulation of ZjCSD gene expression, and Pb~ (2) stress (1g/L Pb~ (2) could induce the down-regulation of ZjCSD gene expression. It is suggested that ZjCSD gene plays an important role in drought, salt and heavy metal stress of Zoysia japonica.
【作者單位】: 北京林業(yè)大學(xué)草坪研究所;河北省作物生長調(diào)控重點實驗室河北農(nóng)業(yè)大學(xué);
【基金】:中國林學(xué)會——青年人才托舉工程項目 國家高新技術(shù)研究發(fā)展計劃項目(2013AA102607)資助
【分類號】:S688.4

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