靶向沉默RACK1基因?qū)θ朔蜗侔┞闶笃は乱浦擦黾盎熋舾行缘挠绊?/H1>

發(fā)布時(shí)間：2018-11-09 15:39

【摘要】：目的:通過(guò)裸鼠皮下移植瘤的體內(nèi)實(shí)驗(yàn),研究沉默活化的蛋白激酶C受體1(receptor for activated C kinase 1,RACK1)表達(dá)對(duì)于肺腺癌腫瘤生長(zhǎng)速度及其對(duì)順鉑、紫杉醇兩種化療藥物敏感性的影響。方法:(1)使用人肺腺癌A549細(xì)胞株建立裸鼠皮下移植瘤模型。(2)待腫瘤直徑為0.3cm-0.5cm時(shí),將荷瘤裸鼠隨機(jī)分成3組,每組18只,分別于瘤內(nèi)注射生理鹽水(Control組)、空載質(zhì)粒-脂質(zhì)體復(fù)合物(Vector-sh RNA組)及sh RNA-RACK1質(zhì)粒-脂質(zhì)體復(fù)合物(RACK1-sh RNA組)。(3)轉(zhuǎn)染成功后,將RACK1-sh RNA組、Vector-sh RNA組和Control組三組根據(jù)注射藥物不同每組分為生理鹽水組、順鉑組和紫杉醇組,每組6只,腹腔灌注化療,隔日給藥。(4)觀察三組裸鼠轉(zhuǎn)染前后與化療前后的皮下移植瘤體積變化,繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線,并用western-blot檢測(cè)各組腫瘤組織中RACK1蛋白的表達(dá)。(5)于28d時(shí)處死裸鼠,剝離腫瘤。一部分移植瘤組織置于4%多聚甲醛固定液中浸泡,石蠟包埋后行HE染色,一部分移植瘤組織置于液氮中保存,行Western Blot檢測(cè)。結(jié)果:(1)成功建立人肺腺癌A549細(xì)胞株裸鼠皮下移植瘤模型,經(jīng)HE染色病理學(xué)檢查,證實(shí)模型具有類似人肺腺癌的病理學(xué)特征。(2)移植瘤形成后第28天,RACK1-sh RNA組皮下移植瘤體積為197.04±39.24mm3,重量為0.17±0.04g;Vector-sh RNA組皮下移植瘤體積為275.35±61.71mm3,重量為0.27±0.06g;Control組皮下移植瘤體積為298.66±49.29mm3,重量為0.28±0.06g;RACK1-sh RNA組較Vector-sh RNA組和Control組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=6.56,P0.05)。(3)Western blot結(jié)果顯示,RACK1-sh RNA組、Vector-sh RNA組和Control組中RACK1相對(duì)表達(dá)量分別為(0.21±0.11),(0.76±0.08)及(0.83±0.05)。與Vector-sh RNA組和Control組相比,RACK1-sh RNA組RACK1蛋白的表達(dá)量顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=97.53,P0.05),Vector-sh RNA組和Control組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(4)在給予順鉑腹腔灌注化療后發(fā)現(xiàn),RACK1-sh RNA組皮下移植瘤體積為144.56±25.94mm3,重量為0.08±0.05g;Vector-sh RNA組皮下移植瘤體積為220.58±38.39mm3,重量為0.20±0.09g;Control組皮下移植瘤體積為264.34±44.87mm3,重量為0.25±0.04g;較Vector-sh RNA組和Control組中注射順鉑的裸鼠相比,于14天、21天、28天RACK1-sh RNA組腫瘤生長(zhǎng)速度相對(duì)緩慢,于28天處死裸鼠,皮下移植瘤重量相對(duì)較小,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F14天=6.03,F21天=10.25,F28天=15.90,F瘤重=12.27,P0.05)。(5)在給予紫杉醇腹腔灌注化療后發(fā)現(xiàn),RACK1-sh RNA組皮下移植瘤體積為150.54±24.82mm3,重量為0.09±0.03g;Vector-sh RNA組皮下移植瘤體積為238.42±46.17mm3,重量為0.24±0.07g;Control組皮下移植瘤體積為239.63±22.58mm3,重量為0.27±0.05g;較Vector-sh RNA組和Control組中注射紫杉醇的裸鼠相比,于14天、21天、28天RACK1-sh RNA組腫瘤生長(zhǎng)速度相對(duì)緩慢,于28天處死裸鼠,皮下移植瘤重量相對(duì)較小,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F14天=14.43,F21天=16.04,F28天=14.42,F瘤重=18.05,P0.05)。結(jié)論:(1)靶向沉默RACK1基因?qū)β闶蠓蜗侔┢は乱浦擦錾L(zhǎng)有明顯抑制作用。(2)靶向沉默RACK1基因可以促進(jìn)人肺腺癌A549細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤對(duì)鉑類和紫杉醇類兩種化療藥物的敏感性,RACK1蛋白可能成為肺腺癌治療的新靶點(diǎn)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R734.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 杜凱麗;梁鋼;康繼輝;米小芳;王宏坤;肖虹;梁建芳;鄭繪霞;;RACK1對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞生物學(xué)行為及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響[J];中國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理;2016年05期

2 康繼輝;杜凱麗;梁鋼;肖虹;王宏坤;梁建芳;鄭繪霞;;活化的蛋白激酶C受體1基因沉默對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞化療敏感性的影響[J];腫瘤研究與臨床;2015年06期

3 楊靜;王宏坤;陰琰;梁鋼;李寧;萬(wàn)惠麗;劉聰;鄭繪霞;;活化的蛋白激酶C受體1在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及意義[J];中國(guó)藥物與臨床;2014年02期

4 楊丹丹;陳友國(guó);;RACK1基因過(guò)表達(dá)對(duì)子宮頸癌細(xì)胞增殖的影響[J];中華婦產(chǎn)科雜志;2012年10期

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本文編號(hào)：2320831

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