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HPV45-L1和HPV58-L1蛋白植物表達載體的構(gòu)建及水稻轉(zhuǎn)基因植株的鑒定

發(fā)布時間:2018-11-03 08:30
【摘要】:利用水稻胚乳細胞生物反應(yīng)器,構(gòu)建含有HPV45-L1和HPV58-L1基因的重組植物表達載體,為HPV-45L1和HPV58-L1蛋白的表達提供一種新的高效、低廉的表達方式。利用PCR技術(shù)克隆人乳頭瘤病毒HPV45-L1和HPV58-L1蛋白編碼基因,將其重組于中間載體pMP3和植物表達載體pCAMBIA-1300中,構(gòu)建含HPV45-L1和HPV58-L1基因的植物表達載體pCAMBIA-1300-pMP3-HPV45-L1、pCAMBIA-1300-pMP3-HPV58-L1,隨后采用根癌農(nóng)桿菌侵染水稻愈傷組織介導(dǎo)的水稻遺傳轉(zhuǎn)化,獲得HPV-L1轉(zhuǎn)基因水稻植株。PCR檢測結(jié)果表明,HPV45-L1和HPV58-L1基因已整合到水稻基因組中,說明已成功構(gòu)建水稻胚乳特異性表達載體。
[Abstract]:A recombinant plant expression vector containing HPV45-L1 and HPV58-L1 genes was constructed by using rice endosperm cell bioreactor to provide a new efficient and low cost expression method for the expression of HPV-45L1 and HPV58-L1 proteins. Human papillomavirus (HPV) HPV45-L1 and HPV58-L1 protein encoding genes were cloned by PCR technique and recombined into the intermediate vector pMP3 and the plant expression vector pCAMBIA-1300. The plant expression vector pCAMBIA-1300-pMP3-HPV45-L1,pCAMBIA-1300-pMP3-HPV58-L1, containing HPV45-L1 and HPV58-L1 genes was constructed, and then Agrobacterium tumefaciens was used to infect rice callus mediated rice genetic transformation. HPV-L1 transgenic rice plants were obtained. PCR analysis showed that HPV45-L1 and HPV58-L1 genes had been integrated into rice genome, indicating that rice endosperm specific expression vector had been constructed successfully.
【作者單位】: 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院;河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院河南省動物免疫學(xué)重點實驗室農(nóng)業(yè)部動物免疫學(xué)重點實驗室;鄭州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】:河南省高?萍紕(chuàng)新團隊和創(chuàng)新人才支持計劃(14HASTIT027)
【分類號】:S511;Q943.2

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