【摘要】：本研究以安徽地方豬種(圩豬、安慶六白豬、皖南黑豬和霍壽黑豬)為試驗材料,以在動物體內(nèi)膽固醇代謝過程中發(fā)揮重要功能的低密度脂蛋白受體(LDLR)基因為候選基因,采用PCR-SSCP技術(shù)檢測LDLR基因部分區(qū)段的遺傳變異,運用SPSS程序最小二乘分析法檢測該遺傳變異與血脂性狀相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)性,并檢測突變位點對LDLR基因在肌肉和肝臟組織表達(dá)的遺傳效應(yīng);運用雙變量相關(guān)性分析檢測肝臟和背最長肌組織LDLR基因的表達(dá)水平對胴體及肉質(zhì)性狀的影響。研究影響血脂性狀相關(guān)功能基因的構(gòu)造、遺傳與變異、表達(dá)及其與相關(guān)性狀的相關(guān)性,選擇可能會存在新的分子標(biāo)記的多態(tài)性位點,以探討利用該基因作為分子標(biāo)記運用于豬遺傳育種的可行性,為安徽地方豬種血脂及肉質(zhì)性狀的遺傳改良提供科學(xué)根據(jù)。試驗結(jié)果如下:(1)LDLR基因組織表達(dá)譜分析:LDLR基因的表達(dá)水平在肝臟中最高,脾臟上的表達(dá)水平最低,組織中從高到低的表達(dá)依次是肝臟、背肌、背脂、心臟、腎、腦、肺、脾。該試驗驗證了LDLR基因在肝臟中的高表達(dá),為后續(xù)試驗的開展提供了科學(xué)依據(jù)。(2)圩豬、安慶六白、皖南黑豬和霍壽黑豬LDLR基因第三內(nèi)含子12088、12093堿基處發(fā)生A→G突變(g.12088AG)和C→T突變(g.12093CT)。通過群體遺傳學(xué)分析表明:在g.12088AG突變位點中檢測到AA、AG、GG三種基因型;在g.12093CT突變位點中檢測到CC、CT、TT三種基因型,經(jīng)過χ2適合性檢驗,被測豬群的基因型頻率和基因頻率都處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài),g.12088AG與g.12093CT兩突變位點是連鎖突變位點。(3)圩豬LDLR基因g.12088AG/g.12093CT突變位點與血液中膽固醇含量的相關(guān)性分析表明:在此兩個位點的突變對血液總膽固醇、高密度和低密度脂蛋白膽固醇含量顯著影響。(4)圩豬LDLR基因在不同基因型個體的肝臟和肌肉中的表達(dá)分析表明:不同基因型的圩豬LDLR在肝臟上的轉(zhuǎn)錄水平有顯著差異,LDLR mRNA在AA/CC型圩豬肝臟中的表達(dá)顯著高于GG/TT型(P0.05);LDLR mRNA在肌肉中的表達(dá)沒有顯著差異。(5)LDLR基因的表達(dá)與胴體、肉質(zhì)性狀的相關(guān)性分析表明:圩豬肝臟LDLR mRNA的表達(dá)量與背最長肌肌肉脂肪酸中的硬脂酸含量呈顯著正相關(guān)(P0.05),與背膘厚呈顯著負(fù)相關(guān);圩豬背最長肌LDLR mRNA的表達(dá)量與背膘厚、肌肉膽固醇、肌內(nèi)脂肪、十六碳烯酸、油酸呈顯著正相關(guān)(P0.05),與肌肉脂肪酸中的硬脂酸和亞油酸呈顯著負(fù)相關(guān)(P0.05)。研究結(jié)果提示:LDLRg.12088AG/g.12093CT位點可以作為圩豬血脂性狀候選遺傳標(biāo)記,以應(yīng)用于血脂性狀的改良。豬LDLR基因可能在血脂性狀和胴體、肉質(zhì)性狀的形成過程中發(fā)揮重要作用。
[Abstract]:In this study, Anhui local pig breeds (Wei pig, Anqing six white pig, southern Anhui black pig and Huoshou black pig) were used as experimental materials, and the candidate genes of low density lipoprotein receptor (LDLR), which play an important role in cholesterol metabolism, were used as candidate genes. PCR-SSCP technique was used to detect the genetic variation in some segments of LDLR gene, and the correlation between the genetic variation and the related indexes of lipid traits was detected by SPSS program least square analysis. The genetic effects of mutation sites on the expression of LDLR gene in muscle and liver were detected. The effects of LDLR gene expression level on carcass and meat quality in liver and longissimus dorsi were detected by bivariate correlation analysis. To study the structure, inheritance and variation of functional genes related to lipid traits, their expression and their correlation with related traits, the selection of polymorphic loci with new molecular markers may exist. To explore the feasibility of using this gene as a molecular marker in pig genetics and breeding, and to provide scientific basis for the genetic improvement of blood lipids and meat quality traits in Anhui local pig breeds. The results were as follows: (1) the expression of LDLR gene: the expression level of LDLR gene was the highest in the liver, the lowest in the spleen, and the highest in the liver, the dorsal muscle, the heart, the kidney and the brain in the tissue. Lung, spleen. This experiment verified the high expression of LDLR gene in liver and provided the scientific basis for the subsequent test. (2) Pigs, Anqing six white, The A G mutation (g.12088AG) and C taut mutation (g.12093CT) occurred in the third intron 12088 of the LDLR gene in southern Anhui black pigs and Huoshou black pigs. Population genetic analysis showed that three genotypes of AA,AG,GG were detected in g.12088AG mutation sites. Three genotypes of CC,CT,TT were detected in the g.12093CT mutation site. The genotype frequency and gene frequency of the tested pigs were in the Hardy-Weinberg equilibrium state after 蠂 2 fitness test. (3) the relationship between g.12088AG/g.12093CT mutation site of LDLR gene and cholesterol content in blood was analyzed. High density and low density lipoprotein cholesterol contents were significantly affected. (4) the expression of LDLR gene in liver and muscle of different genotype individuals showed that the transcriptional level of LDLR in liver of different genotypes was significantly different. The expression of LDLR mRNA in liver of AA/CC type pigs was significantly higher than that of GG/TT type (P0.05). There was no significant difference in the expression of LDLR mRNA in muscle. (5) the expression of LDLR gene and carcass. The correlation analysis of meat quality traits showed that the expression of LDLR mRNA in liver was positively correlated with the content of stearic acid in longissimus dorsi muscle (P0.05) and negatively correlated with backfat thickness. The expression of LDLR mRNA in longissimus dorsi muscle was positively correlated with backfat thickness, muscle cholesterol, intramuscular fat, hexadecenoic acid and oleic acid (P0.05), and negatively correlated with stearic acid and linoleic acid in muscle fatty acids (P0.05). The results suggested that LDLRg.12088AG/g.12093CT locus could be used as a candidate genetic marker for blood lipid traits in fair pigs. Porcine LDLR gene may play an important role in the formation of lipid traits, carcass traits and meat quality traits.
【學(xué)位授予單位】：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S828

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;英國開發(fā)出基因檢測新技術(shù)[J];中國獸醫(yī)學(xué)報;2006年04期

2 霍金龍;苗永旺;曾養(yǎng)志;;基因突變的分子檢測技術(shù)[J];生物技術(shù)通報;2007年02期

3 李思經(jīng);;自動化基因增殖系統(tǒng)[J];生物技術(shù)通報;1988年08期

4 巨智勇;蛋白質(zhì)和基因的改造[J];國外畜牧學(xué)(草食家畜);1987年05期

5 郭月;;肉類防腐劑可能引起基因突變[J];農(nóng)村新技術(shù);2009年06期

6 ;美描繪出基因換位酶的立體結(jié)構(gòu)[J];中國家禽;2000年08期

7 付世耀;;遺傳學(xué)問題題解[J];江西農(nóng)業(yè)科技;1982年03期

8 樊震;基因突變的改進(jìn)[J];生物技術(shù)通報;1994年01期

9 廖曉蘭,朱水芳,羅寬;基因突變和單核苷酸多態(tài)性分析技術(shù)新進(jìn)展[J];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2002年05期

10 胡蘭,胡銳,王娜,崔明珠;MSTN基因的研究進(jìn)展[J];中國獸藥雜志;2004年01期

相關(guān)會議論文 前10條

1 吳競生;徐修才;周榮富;方怡;王學(xué)鋒;翟志敏;王鴻利;;β鏈基因突變引起一例遺傳性無纖維蛋白原血癥[A];中華醫(yī)學(xué)會第八次全國血液學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

2 劉艷;雷小兵;彭振輝;肖生祥;王俊民;周欣;耿松梅;李政宵;;先天性大皰性魚鱗病樣紅皮病1家系的基因突變研究[A];2006中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

3 肖生祥;劉艷;雷小兵;彭振輝;王俊民;周欣;耿松梅;李政宵;;先天性大皰性魚鱗病樣紅皮病1家系的基因突變研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二次全國皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

4 馬紹剛;方佩華;呂枚;許靜;李寧;陳慧;馮潔;;先天性甲狀腺功能減退癥基因突變研究[A];天津市核學(xué)會2005年學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];2005年

5 楊芳;金佩佩;王學(xué)鋒;李薇;丁秋蘭;王冠軍;王鴻利;;2例新的基因突變導(dǎo)致遺傳性蛋白S缺陷癥[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議資料匯編[C];2008年

6 王貴;裘衛(wèi)東;;基因在疼痛與鎮(zhèn)痛中的影響[A];浙江省醫(yī)學(xué)會疼痛學(xué)分會成立大會暨首屆浙江省醫(yī)學(xué)會疼痛學(xué)分會學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2011年

7 孟巖;張續(xù)德;施惠平;趙時敏;姚鳳霞;蘇亮;黃尚志;;顱額鼻綜合征的基因突變研究[A];第八次全國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)術(shù)會議(中華醫(yī)學(xué)會2009年醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)年會)論文摘要匯編[C];2009年

8 曹林枝;;P53基因及其分子生物學(xué)作用[A];廣西生物化學(xué)與分子生物學(xué)會第六次學(xué)術(shù)研討會論文摘要[C];2003年

9 吳雪瓊;張俊仙;李洪敏;梁建琴;鐘敏;王巍;;結(jié)核分支桿菌耐藥基因的研究[A];中國防癆協(xié)會全國學(xué)術(shù)會議大會學(xué)術(shù)報告[C];2001年

10 楊芳;金佩佩;王學(xué)鋒;丁秋蘭;王鴻利;李薇;王冠軍;;2例新的基因突變導(dǎo)致遺傳性蛋白S缺陷癥[A];第11次中國實驗血液學(xué)會議論文匯編[C];2007年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 報道員 周谷風(fēng);基因突變是好是壞[N];新華每日電訊;2010年

2 孫浩;基因檢測：為防病摘除還健康的器官？[N];新華每日電訊;2006年

3 張民;英展開癌癥相關(guān)基因突變測定研究[N];中國醫(yī)藥報;2007年

4 本報記者 李禾;吸煙導(dǎo)致的基因突變可代代相傳？[N];科技日報;2010年

5 醫(yī)學(xué)博士 科學(xué)松鼠會成員 致樺;基因檢測是與非[N];中國經(jīng)營報;2010年

6 本報記者 王丹;天賦基因檢測：預(yù)測未來還是娛樂大眾[N];健康報;2010年

7 江蘇省中醫(yī)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心 賴仁勝;基因檢測放任自流態(tài)勢需扭轉(zhuǎn)[N];健康報;2011年

8 本報實習(xí)記者 楊璇;“基因保存”服務(wù)沒價值[N];北京科技報;2010年

9 實習(xí)生 劉冰玉;檢測癌癥基因能否一紙完成？[N];科技日報;2012年

10 記者 耿建擴(kuò) 通訊員 李晉陶 程益聰;人類8種新發(fā)基因突變被發(fā)現(xiàn)[N];光明日報;2013年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 肖珊;維吾爾族2型糖尿病相關(guān)基因的多態(tài)性及基因—基因、基因—環(huán)境交互作用研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

2 于韶榮;惡性腫瘤患者血漿KRAS基因突變檢測[D];南京大學(xué);2011年

3 楊琳;晚期非小細(xì)胞肺癌EGFR基因突變狀態(tài)的血清多肽質(zhì)譜研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2016年

4 馬亞琳;非綜合征型耳聾患者基因突變熱點篩查及一個耳聾家系MYO7A基因新突變分析[D];山東大學(xué);2016年

5 崔亞娟;第一部分 慢性中性粒細(xì)胞白血病臨床特征及基因突變的研究 第二部分 慢性粒單核細(xì)胞白血病基因突變的研究及預(yù)后意義[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

6 馮磊;基于臨床生化指標(biāo)的冠心病預(yù)測模型建立及其與基因易感性關(guān)聯(lián)的探索研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

7 金佩佩;遺傳性FⅫ缺陷癥分子機(jī)制及血小板相關(guān)疾病研究[D];上海交通大學(xué);2015年

8 茅江峰;不同基因突變對特發(fā)性低促性腺激素性性腺功能減退癥患者的臨床特點、隱睪和生精療效的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

9 楊昭慶;云南省兩種遺傳性血液疾病的基因突變研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2001年

10 李冰;第一部分 原發(fā)性骨髓纖維化患者基因突變的研究 第二部分 原發(fā)性骨髓纖維化患者的細(xì)胞遺傳學(xué)研究 第三部分 血清鐵蛋白是中國骨髓增生異常綜合征中危-1組患者的獨立預(yù)后因素[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 吳晶晶;胃小間質(zhì)瘤P16蛋白表達(dá)及C-Kit基因突變[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 周煉煉;63例慢性淋巴細(xì)胞白血病臨床特征及預(yù)后分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 李娟;Fabry病GLA基因變異與臨床表現(xiàn)的相關(guān)研究[D];石河子大學(xué);2015年

4 楊浩;Peutz-Jeghers綜合征的STK11基因突變研究[D];川北醫(yī)學(xué)院;2015年

5 周雙才;非小細(xì)胞肺癌EGFR基因突變狀態(tài)與中醫(yī)體質(zhì)的相關(guān)性研究[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2015年

6 王慶泊;胃腸道間質(zhì)瘤c-kit基因檢測臨床意義的研究（附119例分析）[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

7 錢曉燕;EGFR及KRAS基因突變臨床檢測方法學(xué)比較及其影響因素分析[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

8 王輝;MET基因mRNA表達(dá)水平在非小細(xì)胞肺癌中的意義[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

9 李武靚;ARMS2/HTRA1基因與年齡相關(guān)性黃斑變性的關(guān)聯(lián)分析[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

10 張立瑩;全基因組、干細(xì)胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子甲基化水平及基因突變在髓系惡性腫瘤預(yù)后判斷中的作用[D];蘇州大學(xué);2015年

，

本文編號：2300340