【摘要】：以"王林"蘋果為試材,采用RT-PCR的方法克隆獲得Mal d 1基因,并將該基因連接到原核表達(dá)載體pColdⅡ上,經(jīng)測序確定所構(gòu)建的重組載體pCold-Mal d 1開放閱讀框正確。將獲得的重組質(zhì)粒pCold-Mal d 1轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)菌株,經(jīng)IPTG 0.1mmol·L~(-1),15℃,24h冷誘導(dǎo)表達(dá),SDS-PAGE電泳檢測,證明Mal d 1蛋白獲得了穩(wěn)定而高效的表達(dá),所表達(dá)蛋白是大小約為22.4kD的融合蛋白。經(jīng)鎳柱純化后獲得相對單一的蛋白,可用于免疫組織化學(xué),蛋白印記檢測等。
[Abstract]:The Mal D1 gene was cloned by RT-PCR from "Wang Lin" apple, and the gene was ligated to the prokaryotic expression vector pCold 鈪，

本文編號：2296441