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中國(guó)水仙NtSOC1基因克隆及亞細(xì)胞定位

發(fā)布時(shí)間:2018-10-25 15:47
【摘要】:以中國(guó)水仙‘金盞銀臺(tái)’為實(shí)驗(yàn)材料,采用RACE和RT-PCR技術(shù)獲得1個(gè)與開花相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子(SOC1)的同源基因NtSOC1。NtSOC1的cDNA全長(zhǎng)1 603bp,含有1個(gè)687bp開放閱讀框,編碼228個(gè)氨基酸。生物信息學(xué)分析表明,NtSOC1與單子葉植物的SOC1同源基因的氨基酸序列較為相似,且在C末端同樣含有一個(gè)保守性很高的SOC1motif序列,說(shuō)明NtSOC1是屬于SOC1/TM3亞家族基因。熒光定量PCR分析顯示,NtSOC1在花芽分化階段的表達(dá)量隨著花芽的分化而升高,花芽分化結(jié)束時(shí)減少,表明NtSOC1基因可能參與中國(guó)水仙的花芽分化。成功構(gòu)建了NtSOC1基因表達(dá)載體pCAMBIA1302-NtSOC1,通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化洋蔥表皮對(duì)編碼蛋白進(jìn)行亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示,NtSOC1基因編碼蛋白定位于細(xì)胞核,符合轉(zhuǎn)錄因子的亞細(xì)胞定位特征。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果為進(jìn)一步研究NtSOC1基因的生物學(xué)功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The cDNA of the homologous gene NtSOC1.NtSOC1 of anthesis related transcription factor (SOC1) was obtained by RACE and RT-PCR from Narcissus chinensis (Narcissus chinensis) as experimental material. The cDNA contained an open reading frame of 687bp encoding 228 amino acids. Bioinformatics analysis showed that the amino acid sequence of SOC1 homologous gene of NtSOC1 and Monocotyledonous plants was similar, and a highly conserved SOC1motif sequence was also found at the C-terminal, indicating that NtSOC1 belongs to the SOC1/TM3 subfamily gene. Fluorescence quantitative PCR analysis showed that the expression of NtSOC1 increased with flower bud differentiation and decreased at the end of flower bud differentiation, suggesting that NtSOC1 gene might be involved in flower bud differentiation of Narcissus chinensis. The NtSOC1 gene expression vector pCAMBIA1302-NtSOC1, was successfully constructed and transformed into onion epidermis by Agrobacterium tumefaciens for subcellular localization of the encoded protein. The results showed that the encoded protein of NtSOC1 gene was located in the nucleus and accorded with the subcellular localization characteristics of transcription factors. The results laid a foundation for further study of the biological function of NtSOC1 gene.
【作者單位】: 福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31601783) 福建省自然科學(xué)基金(2014J01083)
【分類號(hào)】:Q943.2;S682.21

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本文編號(hào):2294147

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