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辣椒細胞質(zhì)雄性不育相關(guān)基因的克隆與表達分析

發(fā)布時間:2018-10-24 17:59
【摘要】:以辣椒細胞質(zhì)雄性不育系21A及其相應(yīng)保持系21B為試材,根據(jù)辣椒細胞質(zhì)雄性不育相關(guān)基因orf456序列設(shè)計特異引物,對21A及21B的基因組DNA進行特異性擴增,獲得了不育系特有的目的條帶,克隆測序表明其大小為292bp,命名為CMS292。采用QRT-PCR方法,研究了CMS292分別在蕾期、盛花期對根、莖、葉和花蕾中的表達水平的影響,以期探索雄性不育相關(guān)基因的表達機制。結(jié)果表明:該基因只在不育系中表達,并且在所檢測的組織中都有表達;蕾期根和花蕾中的表達量明顯高于莖和葉,盛花期根和葉中的表達量高于莖和花蕾;從蕾期到盛花期根、莖和花蕾中的表達量呈下降趨勢,而葉中的表達量呈上升趨勢,推測CMS292控制辣椒花藥中蛋白的表達,引起小孢子敗育,進而導(dǎo)致雄性不育。
[Abstract]:The cytoplasmic male sterility (CMS) line 21A and its maintainer line 21B were used as test materials. Specific primers were designed according to the orf456 sequence of cytoplasmic male sterility related genes in capsicum, and the genomic DNA of 21A and 21B were amplified specifically. A specific target band of male sterile line was obtained. Cloning and sequencing showed that its size was 292 BP, named CMS292.. The effects of CMS292 on the expression levels of root, stem, leaf and bud in bud stage and flowering stage were studied by QRT-PCR method, in order to explore the expression mechanism of male sterility related genes. The results showed that the gene was only expressed in sterile lines and expressed in all the tested tissues, and the expression levels in roots and buds at bud stage were significantly higher than those in stems and leaves, and those in roots and leaves in flowering stage were higher than those in stems and buds. From bud stage to full flowering stage, the amount of expression in stem and bud decreased, but increased in leaf. It was speculated that CMS292 controlled the expression of protein in anther of capsicum, which led to microspore abortion and then to male sterility.
【作者單位】: 江蘇省中國科學(xué)院植物研究所;江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所;
【基金】:國家“863”計劃資助項目(2006AA100108,2008AA10Z150) 國家科技支撐計劃資助項目(2006BAD01A7-04-03,2008BADB1B04) 江蘇省科技支撐計劃資助項目(BE2009309) 江蘇省中國科學(xué)院植物研究所“綠手指”基金資助項目(01-06-11)
【分類號】:S641.3

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本文編號:2292127

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