【摘要】：【目的】優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)條件及加倍xim基因簇,提高廈門霉素的產(chǎn)量�！痉椒ā坎捎脝我蛩靥砑�:C源(鼠李糖、葡萄糖酸)、無機N源(KNO3)、稀有金屬元素(Sc Cl3)及A-Factor(γ-丁內(nèi)酯),優(yōu)化適宜廈門鏈霉菌318菌株產(chǎn)生廈門霉素的培養(yǎng)條件;通過位點特異性整合將廈門霉素生物合成基因簇進行加倍,構建高產(chǎn)的基因工程菌株廈門鏈霉菌318Pls1,并對其培養(yǎng)基進行了正交實驗優(yōu)化�！窘Y果】與初產(chǎn)量(15 mg/L)相比,在GYM培養(yǎng)基中進行單因素添加可使318菌株的廈門霉素產(chǎn)量達到20 mg/L;而基因簇加倍菌株318Pls1在GYM培養(yǎng)基上的廈門霉素產(chǎn)量可達35 mg/L,在正交實驗優(yōu)化后的9#培養(yǎng)基中廈門霉素產(chǎn)量可達76.15 mg/L�！窘Y論】對廈門霉素的發(fā)酵培養(yǎng)條件進行了優(yōu)化,并通過基因簇過表達獲得了生物合成能力提高的菌株,為進一步提高其產(chǎn)量奠定了基礎。
[Abstract]:[objective] to optimize the fermentation conditions and double xim gene cluster to increase the yield of Xiamen mycin. [methods] single factor addition: C source (rhamnose) was used. Gluconic acid, inorganic N source (KNO3), rare metal element (Sc Cl3) and A-Factor (緯 -butyrolactone) were optimized for the production of Xiamen mycin by Streptomyces Xiamen 318, and the biosynthesis gene cluster of Xiamen mycin was doubled by site-specific integration. The high yield genetic engineering strain Streptomyces Xiamen 318Pls1 was constructed, and its medium was optimized by orthogonal experiment. [results] compared with the initial yield (15 mg/L), the culture medium of Streptomyces Xiamen was optimized by orthogonal experiment. By adding a single factor into GYM medium, the yield of Xiamen mycin of 318 strain can reach 20 mg/L;, and that of 318Pls1 of gene cluster doubling strain on GYM medium can reach 35 mg/L,. After orthogonal experiment, the yield of Xiamen mycin can reach 35 mg/L,. After orthogonal experiment, the yield of Xiamen mycin can be up to 35 mg/L,. The yield of amphomycin was 76.15 mg/L. [conclusion] the fermentation conditions of Xiamen mycin were optimized. The strain with improved biosynthesis ability was obtained by over-expression of gene cluster, which laid a foundation for further increasing its yield.
【作者單位】： 上海交通大學生命科學技術學院微生物代謝國家重點實驗室;上海交通大學系統(tǒng)生物醫(yī)學研究院;上海交通大學海洋研究院;
【基金】：國家自然科學基金項目(No.81473105)~~
【分類號】：TQ920.6

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8 金以孭;R壏ù，

本文編號：2284383