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Bcl-2和BaK基因沉默對(duì)MG-63細(xì)胞凋亡和成骨活動(dòng)的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-10-20 16:37
【摘要】:目的探討B(tài)cl-2和Bak基因沉默對(duì)MG-63細(xì)胞凋亡、成骨活動(dòng)以及鈣離子濃度的影響。方法構(gòu)建沉默Bcl-2和BaK表達(dá)的腺病毒載體,scramble RNA載體轉(zhuǎn)染MG-63細(xì)胞,采用MTT檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率的情況,并應(yīng)用ALP觀察轉(zhuǎn)染后細(xì)胞成骨活動(dòng)情況以及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)鈣離子的濃度間接測(cè)定細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果 Bcl-2基因沉默后48 h相對(duì)對(duì)照組,細(xì)胞存活率降低,成骨活動(dòng)減少,鈣離子濃度升高;BaK基因沉默后細(xì)胞增存活率升高,成骨活動(dòng)增加,細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度降低,而Bcl-2+BaK聯(lián)合沉默組與對(duì)照組在各觀察指標(biāo)上差異無(wú)顯著性。結(jié)論 Bcl-2和BaK基因沉默對(duì)人成骨肉瘤MG-63細(xì)胞凋亡,鈣離子濃度變化以及成骨活動(dòng)產(chǎn)生影響,表明其可能與骨質(zhì)疏松的發(fā)病有密切的關(guān)聯(lián)。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of Bcl-2 and Bak gene silencing on apoptosis, osteogenesis and calcium concentration in MG-63 cells. Methods Adenoviral vector, scramble RNA, which silenced the expression of Bcl-2 and BaK, was constructed and transfected into MG-63 cells. MTT was used to detect the survival rate of the transfected cells. The osteogenic activity of transfected cells was observed by ALP and apoptosis was detected indirectly by flow cytometry. Results 48 hours after Bcl-2 gene silencing, cell survival rate decreased, osteogenesis activity decreased and calcium concentration increased, while BaK gene silencing increased cell viability, osteogenesis activity and intracellular calcium concentration. However, there was no significant difference between the Bcl-2 BaK combined silencing group and the control group. Conclusion Bcl-2 and BaK gene silencing has an effect on apoptosis, calcium concentration and osteogenesis activity of human osteosarcoma MG-63 cells, suggesting that the silencing of Bcl-2 and BaK genes may be closely related to the pathogenesis of osteoporosis.
【作者單位】: 廣州中醫(yī)藥大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院;廣州中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院;廣州中醫(yī)藥大學(xué)護(hù)理學(xué)院;廣州中醫(yī)藥大學(xué)研究生學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào):81674004,81373653) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):2016A020216024)
【分類號(hào)】:R580

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本文編號(hào):2283737

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