【摘要】：本實驗將基于埃博拉病毒表面糖蛋白抗原GP基因序列,按照哺乳動物密碼子使用頻率優(yōu)化,并與人IgG恒定區(qū)構建融合蛋白GP-Fc基因序列,重組蛋白序列插入基因疫苗載體pVR中,構建重組蛋白基因疫苗pVRmodGP-Fc。通過基因疫苗導入系統(tǒng)免疫小鼠,用間接ELISA和間接免疫熒光對抗體效價進行評估。實驗結果顯示,重組蛋白GP-Fc的基因疫苗可以很好的刺激小鼠產生特異性抗體,免疫周期結束后,小鼠血清中結合效價終點達到高劑量組1∶300 000及低劑量組1∶180 000,同時血清中的抗體可以很好地結合表達GP抗原的細胞表面,表現(xiàn)出很強的熒光信號。通過該研究我們驗證重組蛋白基因疫苗pVR-modGP-Fc可以很好地誘導BALB/c小鼠產生較高滴度的抗原特異性IgG,具有較好的免疫原性。
[Abstract]:Based on the sequence of GP gene of Ebola virus surface glycoprotein antigen, the gene sequence of fusion protein GP-Fc gene was constructed according to the frequency of mammalian codon use, and the recombinant protein sequence was inserted into the gene vaccine vector pVR. Construction of Recombinant protein Gene Vaccine pVRmodGP-Fc. The antibody titers were evaluated by indirect ELISA and indirect immunofluorescence. The results showed that the recombinant protein GP-Fc gene vaccine could well stimulate the production of specific antibodies in mice, and after the end of the immune cycle, The binding titer of mouse serum reached 1: 300 000 in high dose group and 1: 180 000 in low dose group. At the same time, the antibody in serum could bind well to the surface of cells expressing GP antigen, and showed strong fluorescence signal. Through this study we proved that recombinant protein gene vaccine pVR-modGP-Fc could induce BALB/c mice to produce higher titers of antigen-specific IgG, with good immunogenicity.
【作者單位】： 北京工業(yè)大學生命科學與生物工程學院;中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所衛(wèi)生部醫(yī)學病毒和病毒病重點實驗室;
【基金】：埃博拉出血熱防控應急研究(項目號:1061400100275)
【分類號】：R392

【參考文獻】

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