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低溫對(duì)巨桉葉片糖含量變化的影響及巨桉糖基轉(zhuǎn)移酶基因家族EgrGATL的表達(dá)特性分析

發(fā)布時(shí)間:2018-09-14 11:44
【摘要】:低溫等非生物逆境因子對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育有非常重要的影響。在響應(yīng)逆境因子的脅迫過程中,植物會(huì)采取相應(yīng)的措施應(yīng)對(duì)脅迫。逆境條件下,植物糖基轉(zhuǎn)移酶通過糖基轉(zhuǎn)移作用影響細(xì)胞壁的組成和結(jié)構(gòu),進(jìn)而產(chǎn)生逆境響應(yīng)。GATL是植物中重要的糖基轉(zhuǎn)移酶基因,它屬于GT8糖基轉(zhuǎn)移酶超基因家族。本論文以巨桉為材料,開展了一系列研究,結(jié)果如下:1.巨桉在4℃不同時(shí)間處理下,葉片中可溶性糖含量逐漸增加,同時(shí)參與細(xì)胞壁成分構(gòu)成的阿拉伯糖、半乳糖等也有所增加。2.通過同源比對(duì),在巨桉中共發(fā)現(xiàn)9個(gè)EgrGATL基因,其中EgrGATL8基因序列較短。這9個(gè)GATL基因都含有一個(gè)保守的GT8結(jié)構(gòu)域,除EgrGATL8外,其他基因的氨基酸序列都具有GATL序列的特征性基序:DSD、HWSGKGKPW、GSLLPPFLIVF、CYFNTGVMVMD**RWR、WNQHGLGGD、R*YLAD*L*P。3.組織特異性表達(dá)方面,不同的EgrGATL基因表達(dá)模式有所不同,但有一個(gè)共同特點(diǎn)既葉片中的表達(dá)量相對(duì)于莖和根組織較低。在低溫(-8,-4,0,4,8°C)脅迫下除EgrGATL7,9外,其他EgrGATL基因均在一定程度上受到誘導(dǎo),EgrGATL7,9則在不同低溫下受到明顯的抑制;4℃不同時(shí)間處理下,EgrGATLs基因表達(dá)模式分為三種類型:EgrGATL1,3,8不同時(shí)間處理下都處于受誘導(dǎo)的狀態(tài);EgrGATL2,4,6處理早期基因表達(dá)受誘導(dǎo),隨處理時(shí)間的延長(zhǎng),基因表達(dá)開始受到抑制;而EgrGATL5,7,9在4℃低溫下表現(xiàn)出被抑制的情況。200mmol·L-1NaCl脅迫下,隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng),EgrGATL1,8的表達(dá)逐漸下降;EgrGATL3,4,5,6,7的表達(dá)模式相同,都在處理24h時(shí)有一個(gè)明顯的表達(dá)躍升,而后又下降。100μmol·L-1ABA超過24小時(shí)的處理會(huì)導(dǎo)致除EgrGATL7外的其他基因表達(dá)受到抑制,這一點(diǎn)與鹽處理相似。MeJA處理會(huì)快速誘導(dǎo)EgrGATLs基因的表達(dá),處理2小時(shí),被檢測(cè)的8個(gè)EgrGATLs基因表達(dá)都有大幅度的上升。干旱脅迫下EgrGATLs的表達(dá)隨處理時(shí)間的變化都呈現(xiàn)誘導(dǎo)、抑制再誘導(dǎo)的節(jié)律性變化;另外,EgrGATLs基因表達(dá)整體上還受光照的促進(jìn),黑暗的抑制。4.亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示,EgrGATL1和EgrGATL3在細(xì)胞核和細(xì)胞膜上都有表達(dá),EgrGATL5只在細(xì)胞膜上有表達(dá),EgrGATL8在細(xì)胞中廣泛表達(dá)。5.選擇受低溫誘導(dǎo)的EgrGATL1進(jìn)行異源轉(zhuǎn)化擬南芥,并對(duì)獲得的純合轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行低溫、ABA和NaCl處理實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)野生型和轉(zhuǎn)基因幼苗在表型上沒有明顯差異。其可能原因是巨桉抗寒性提高需要EgrGATL基因與其他基因協(xié)同作用才能實(shí)現(xiàn),而單一EgrGATL基因的高表達(dá)并不能產(chǎn)生明顯的效果。
[Abstract]:Abiotic stress factors such as low temperature have a very important effect on plant growth and development. In response to stress factors, plants will take appropriate measures to deal with stress. Under stress conditions, plant glycosyltransferases affect cell wall composition and structure through glycosyl transfer, and then produce stress response. GATL is an important glycosyltransferase gene in plants, which belongs to the GT8 glycosyltransferase supergene family. In this paper, Eucalyptus grandis as a material, a series of studies were carried out, the results are as follows: 1. The soluble sugar content in leaves of Eucalyptus grandis increased gradually at 4 鈩,

本文編號(hào):2242616

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