【摘要】：從玉米自交系鄭58中克隆Zm IPT2基因并構(gòu)建單子葉植物表達(dá)載體,通過農(nóng)桿菌侵染萌動(dòng)胚方法將其轉(zhuǎn)入玉米自交系K10中,對轉(zhuǎn)基因后代進(jìn)行分子檢測和功能驗(yàn)證。結(jié)果表明,Zm IPT2基因c DNA全長969 bp,成功構(gòu)建其單子葉植物表達(dá)載體p CAMBIA5300-ubi-Zm IPT2。農(nóng)桿菌侵染萌動(dòng)胚法共轉(zhuǎn)化K10種子5 163粒,獲得T0代PCR陽性幼苗48株,其中13株結(jié)實(shí)收獲種子;獲得的3個(gè)T2代株系PCR陽性率符合3∶1的分離比,且RT-PCR檢測呈陽性;2個(gè)T2代轉(zhuǎn)基因株系的成熟期葉綠素含量和細(xì)胞分裂素含量極顯著高于對照,相對綠葉面積和葉面積持綠期極顯著或顯著高于對照,百粒重和小區(qū)產(chǎn)量顯著高于對照。結(jié)果初步證明,Zm IPT2基因在玉米中的過表達(dá)可延緩葉片衰老,提高玉米產(chǎn)量。
[Abstract]:The Zm IPT2 gene was cloned from maize inbred line Zheng58 and the expression vector of monocotyledonous plant was constructed. The gene was transferred into maize inbred line K10 by Agrobacterium tumefaciens infection and germinating embryo method. The results showed that the full length of c DNA of Zm IPT2 gene was 969 bp, and its monocotyledonous expression vector p CAMBIA5300-ubi-Zm IPT2. was successfully constructed. A total of 5,163 K10 seeds were transformed by Agrobacterium tumefaciens infecting germinating embryo, 48 T0 generation PCR positive seedlings were obtained, 13 of them harvested seeds, and the PCR positive rate of 3 T2 lines was in accordance with the isolation ratio of 3:1. The chlorophyll content and cytokinin content of 2 T2 transgenic lines were significantly higher than that of the control, and the relative green leaf area and leaf area were significantly or significantly higher than those of the control. 100 seed weight and plot yield were significantly higher than the control. The results showed that the overexpression of Zm IPT2 gene in maize could delay leaf senescence and increase maize yield.
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院;巴彥淖爾市農(nóng)牧業(yè)科學(xué)研究院;重慶市農(nóng)業(yè)科學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所;
【基金】：國家轉(zhuǎn)基因生物新品種選育重大專項(xiàng)(2016ZX08003003-005) 黑龍江省留學(xué)歸國人員科學(xué)基金(LC201411)
【分類號(hào)】：S513

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2237840