【摘要】：培育抗草甘膦除草劑棉花品種對棉花生產(chǎn)具有重要意義。利用農(nóng)桿菌介導法獲得了大量抗除草劑草甘膦棉花的再生植株,對其進行陽性檢測。通過確定PCR檢測目標條帶大小、蛋白雜交條帶大小分子特征,對65個獨立轉(zhuǎn)化事件在DNA水平、蛋白水平進行分析和篩選。結(jié)果表明,經(jīng)PCR檢測再生植株DNA得到的陽性率平均值為81.5%,經(jīng)過蛋白檢測后陽性率確定為55.4%,該類陽性植株即為外源基因正常表達的轉(zhuǎn)基因植株。在此基礎上,結(jié)合田間抗性檢測,對其中9個株系進行了不同世代的選擇,經(jīng)過綜合鑒定篩選,發(fā)現(xiàn)2個抗性優(yōu)良的轉(zhuǎn)基因株系具有極高的利用價值,其余還需進一步篩選鑒定。
[Abstract]:It is of great significance to cultivate herbicide resistant cotton varieties for cotton production. A large number of regenerated plants of herbicide resistant glyphosate cotton were obtained by Agrobacterium tumefaciens. By determining the molecular characteristics of target band size and protein hybridization band size in PCR detection, 65 independent transformation events were analyzed and screened at DNA level and protein level. The results showed that the average positive rate of DNA in regenerated plants by PCR was 81.5 and the positive rate was 55.4 after protein detection. The positive rate of the positive plants was transgenic plants with normal expression of exogenous genes. On the basis of this, 9 of them were selected for different generations by field resistance test. Through comprehensive identification and screening, it was found that two transgenic lines with excellent resistance had high utilization value. The others need further screening and identification.
【作者單位】： 山西省農(nóng)業(yè)科學院棉花研究所;浙江大學農(nóng)業(yè)與生物技術學院;運城學院生命科學系;
【基金】：國家科技重大專項——轉(zhuǎn)基因生物新品種培育(2014ZX08010-003) 國家自然科學基金項目(31201253) 山西省自然科學青年基金(2013021024-3) 山西省農(nóng)業(yè)科學院博士基金(YBSJJ1204)
【分類號】：S562

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