發(fā)布時(shí)間：2018-08-27 20:52

【摘要】：培育抗草甘膦除草劑棉花品種對(duì)棉花生產(chǎn)具有重要意義。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法獲得了大量抗除草劑草甘膦棉花的再生植株,對(duì)其進(jìn)行陽性檢測(cè)。通過確定PCR檢測(cè)目標(biāo)條帶大小、蛋白雜交條帶大小分子特征,對(duì)65個(gè)獨(dú)立轉(zhuǎn)化事件在DNA水平、蛋白水平進(jìn)行分析和篩選。結(jié)果表明,經(jīng)PCR檢測(cè)再生植株DNA得到的陽性率平均值為81.5%,經(jīng)過蛋白檢測(cè)后陽性率確定為55.4%,該類陽性植株即為外源基因正常表達(dá)的轉(zhuǎn)基因植株。在此基礎(chǔ)上,結(jié)合田間抗性檢測(cè),對(duì)其中9個(gè)株系進(jìn)行了不同世代的選擇,經(jīng)過綜合鑒定篩選,發(fā)現(xiàn)2個(gè)抗性優(yōu)良的轉(zhuǎn)基因株系具有極高的利用價(jià)值,其余還需進(jìn)一步篩選鑒定。
[Abstract]:It is of great significance to cultivate herbicide resistant cotton varieties for cotton production. A large number of regenerated plants of herbicide resistant glyphosate cotton were obtained by Agrobacterium tumefaciens. By determining the molecular characteristics of target band size and protein hybridization band size in PCR detection, 65 independent transformation events were analyzed and screened at DNA level and protein level. The results showed that the average positive rate of DNA in regenerated plants by PCR was 81.5 and the positive rate was 55.4 after protein detection. The positive rate of the positive plants was transgenic plants with normal expression of exogenous genes. On the basis of this, 9 of them were selected for different generations by field resistance test. Through comprehensive identification and screening, it was found that two transgenic lines with excellent resistance had high utilization value. The others need further screening and identification.
【作者單位】： 山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所;浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院;運(yùn)城學(xué)院生命科學(xué)系;
【基金】：國(guó)家科技重大專項(xiàng)——轉(zhuǎn)基因生物新品種培育(2014ZX08010-003) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31201253) 山西省自然科學(xué)青年基金(2013021024-3) 山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士基金(YBSJJ1204)
【分類號(hào)】：S562

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6 董流昕;轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆參比分子的構(gòu)建[D];北京林業(yè)大學(xué);2005年

7 李衛(wèi)國(guó);棉花抗草甘膦體細(xì)胞無性系變異篩選技術(shù)研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

8 于海濤;抗草甘膦真菌的分離及EPSPS基因克隆與表達(dá)研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

9 趙錦慧;玉米抗草甘膦突變體的篩選及成熟胚培養(yǎng)的初步研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

10 孫賓成;東北高寒地區(qū)抗草甘膦大豆栽培技術(shù)研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

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