【摘要】：為篩選夜香樹(Cestrum nocturnum L.)香氣釋放、生物鐘等相關(guān)基因表達(dá)研究適用的內(nèi)參基因,本研究采用夜香樹盛花期葉片和花為實驗材料,利用同源克隆和RACE技術(shù),獲得了夜香樹6種經(jīng)典的內(nèi)參基因序列,分別為:Actb7、EF-1A、GAPDH、TUA、TUB2、UBQ;采用熒光定量PCR方法對18s rRNA和這6個內(nèi)參基因的表達(dá)模式進(jìn)行了分析,并通過Bestkeeper、ge Norm、Norm Finder 3種程序分析了內(nèi)參基因的穩(wěn)定性。結(jié)果表明,在花中,Actb7表達(dá)最穩(wěn)定;在葉片中,EF-1A和UBQ的表達(dá)比較穩(wěn)定;在2種組織中,EF-1A的表達(dá)相對穩(wěn)定。3組穩(wěn)定性分析中,ge Norm程序確定的最佳內(nèi)參基因數(shù)目均為2,最佳內(nèi)參基因組合均為Actb7/EF-1A。本研究通過對穩(wěn)定內(nèi)參基因的篩選,以期為準(zhǔn)確檢測夜香樹盛花期花瓣節(jié)律運(yùn)動、香氣釋放、生物鐘變化等相關(guān)基因的表達(dá)研究奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:To screen (Cestrum nocturnum L.) for Nightwood Aroma release, biological clock and other related genes were used to study the expression of internal reference genes. In this study, six classical internal reference gene sequences were obtained by homologous cloning and RACE techniques. The expression patterns of 18 s rRNA and 6 internal reference genes were analyzed by fluorescence quantitative PCR method, and the stability of the internal reference genes was analyzed by Bestkeeper,ge Norm,Norm Finder. The results showed that the expression of Actb7 was the most stable in flower and the expression of EF-1A and UBQ in leaves was stable. Stability analysis of EF-1A expression in two tissues: the optimal number of internal reference genes determined by ge Norm program is both 2, and the best combination of internal reference genes is Actb7/EF-1A.. The aim of this study was to screen stable internal ginseng genes in order to accurately detect the expression of related genes such as petal rhythm, aroma release, biological clock changes and so on.
【作者單位】： 福建農(nóng)林大學(xué)園藝產(chǎn)品貯存保鮮研究所;
【基金】：福建省自然科學(xué)基金項目(2016J01110)~~
【分類號】：Q943.2;S685.99

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本文編號：2207978