發(fā)布時間：2018-08-27 11:05

【摘要】：目的檢測DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在肌萎縮側(cè)索硬化癥(ALS)轉(zhuǎn)基因鼠海馬中的表達變化,揭示DDX3和CK1ε的表達改變與ALS發(fā)病的關(guān)系。方法 33只ALS轉(zhuǎn)基因鼠和33只野生型鼠分別于發(fā)病不同時期取材,應(yīng)用RT-PCR和Western blotting技術(shù)檢測海馬組織中DDX3和CK1ε的表達變化;通過免疫熒光雙標染色技術(shù)觀察DDX3和CK1ε陽性細胞的分布特點及其與神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞等的共表達情況。結(jié)果與野生型鼠相比,ALS轉(zhuǎn)基因鼠海馬中DDX3 mRNA和蛋白在發(fā)病早期變化不明顯,中期和晚期表達均明顯降低;CK1εmRNA和蛋白則在發(fā)病早期、中期和晚期表達均降低。免疫熒光雙標結(jié)果顯示,在ALS鼠和野生型鼠海馬齒狀回區(qū)和CA區(qū)均可檢測到DDX3和CK1ε陽性細胞。DDX3和CK1ε主要表達在神經(jīng)元,在星形膠質(zhì)細胞未見表達。與野生型鼠比較,ALS轉(zhuǎn)基因鼠海馬中DDX3和CK1ε免疫反應(yīng)性明顯降低。結(jié)論 DDX3和CK1εmRNA和蛋白在ALS轉(zhuǎn)基因鼠海馬中表達均降低,表明DDX3和CK1ε表達異常與ALS海馬區(qū)病變密切相關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of DDX3 and casein kinase 1 蔚 (CK1 蔚) in hippocampus of (ALS) transgenic rats with amyotrophic lateral sclerosis (ALS), and to explore the relationship between the expression of DDX3 and CK1 蔚 and the pathogenesis of ALS. Methods 33 ALS transgenic mice and 33 wild type mice were collected at different stages of the disease. The expression of DDX3 and CK1 蔚 in hippocampus were detected by RT-PCR and Western blotting techniques. The distribution of DDX3 and CK1 蔚 positive cells and their coexpression with neurons and astrocytes were observed by double immunofluorescence staining. Results compared with wild-type mice, the expression of DDX3 mRNA and protein in hippocampus of ALS transgenic mice did not change significantly in the early stage, while the expression of CK1 蔚 mRNA and protein decreased significantly in the middle and late stages of the disease, while the expression of CK1 蔚 mRNA and protein decreased in the early, middle and late stages of the disease. The results of immunofluorescence double labeling showed that DDX3 and CK1 蔚 positive cells, DDX3 and CK1 蔚 were mainly expressed in neurons, but not in astrocytes, in the dentate gyrus and CA regions of ALS mice and wild type mice. Compared with wild-type mice, the DDX3 and CK1 蔚 immunoreactivity in hippocampus of ALS transgenic mice decreased significantly. Conclusion the expression of DDX3 and CK1 蔚 mRNA and protein in the hippocampus of ALS transgenic mice is decreased, which indicates that the abnormal expression of DDX3 and CK1 蔚 is closely related to the ALS hippocampal lesion.
【作者單位】： 濰坊醫(yī)學(xué)院組織學(xué)與胚胎學(xué)教研室;濰坊醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)教研室;濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院骨科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81401066,81271413) 山東省自然科學(xué)基金(ZR2012HQ021,2012HL42) 山東省科技發(fā)展計劃項目(2012GSF11827) 山東省教育廳課題(J11LF16,J12LK01) 濰坊醫(yī)學(xué)院大學(xué)生科技創(chuàng)新基金(KX2016009,KX2016015)
【分類號】：R744.8

【參考文獻】

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本文編號：2207084