【摘要】：傳統(tǒng)轉基因技術,如顯微注射、轉座子、慢病毒轉染等將目的基因插入基因組內的整合方式是隨機的,這些隨機整合對后期轉基因動物品系組建和育種帶來諸多不利,因此有研究人員提出了定點整合轉基因技術。目前該技術的定點整合效率非常低,主要取決于兩個方面:一是靶位點產生DNA雙鏈斷裂(double-strand break,DSB)的效率;二是斷裂后的靶位點與攜帶同源臂及外源基因的供體質粒發(fā)生同源重組的效率,其中同源重組修復(homologous recombination repair,HDR)是基因組定點整合最為依賴的修復機制。靶位點產生DSB后,機體的DNA修復既可能發(fā)生HDR,也可能發(fā)生非同源末端連接(nonhomologous end joining,NHEJ),并且兩者之間存在競爭關系,因此激活HDR或抑制NEHJ都可提高定點整合轉基因的效率。本文結合影響定點整合的因素,對提高定點整合效率最新探索方面進行了綜述。
[Abstract]:Traditional transgenic techniques, such as microinjection, transposon, and lentivirus transfection, are random in the integration of target genes into the genome. These random integrations are detrimental to strain formation and breeding of late transgenic animals. Therefore, some researchers have proposed a targeted integration of transgenic technology. At present, the efficiency of fixed-point integration is very low, which mainly depends on two aspects: first, the efficiency of DNA double-strand break (double-strand break,DSB) produced by target sites; The second is the efficiency of homologous recombination between the target sites and donor plasmids carrying homologous arms and foreign genes. Homologous recombination repair of (homologous recombination repair,HDR) is the most dependent repair mechanism of genomic site-directed integration. After the target site produces DSB, the DNA repair of the body may occur both HDR, and non-homologous terminal junction (nonhomologous end joining,NHEJ), and there is a competitive relationship between the two. Therefore, activation of HDR or inhibition of NEHJ can improve the efficiency of site-directed integration. This paper reviews the latest exploration of improving the efficiency of fixed-point integration.
【作者單位】： 華南農業(yè)大學動物科學學院國家生豬種業(yè)工程技術研究中心;廣東溫氏食品集團股份有限公司;
【基金】：國家轉基因重大專項(編號:2016ZX08006002) 粵西“揚帆計劃”博士后人才扶持基金資助項目(2015)資助~~
【分類號】：Q78

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本文編號：2206156