【摘要】：目的:探討FBXW7基因點(diǎn)突變對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞株HCT-116增殖、凋亡、遷移和侵襲的影響。方法:通過構(gòu)建FBXW7基因野生型及突變型過表達(dá)的重組載體,并將其轉(zhuǎn)染HCT-116細(xì)胞,應(yīng)用蛋白免疫印跡法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后FBXW7蛋白表達(dá)情況。CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,平板細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)(HTCA)檢測(cè)腫瘤細(xì)胞克隆形成能力,流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況、劃痕及細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)(Transwell)檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲能力。結(jié)果:轉(zhuǎn)染野生型的HCT-116細(xì)胞中FBXW7蛋白表達(dá)水平高于對(duì)照組(轉(zhuǎn)染突變型FBXW7的HCT-116細(xì)胞)、陰性對(duì)照組(轉(zhuǎn)染空載體p EZ-M90的HCT-116細(xì)胞)及空白對(duì)照組(未進(jìn)行轉(zhuǎn)染的HCT-116細(xì)胞)(p值均0.05)。轉(zhuǎn)染野生型的HCT-116細(xì)胞的增殖、克隆形成、遷移和侵襲能力相較于其余各組均明顯下降(P值均0.05),且細(xì)胞凋亡率明顯升高(p0.05)。結(jié)論:FBXW7基因點(diǎn)突變可影響FBXW7蛋白表達(dá),從而降低FBXW7基因在結(jié)直腸癌細(xì)胞HCT-116細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移抑制作用及其凋亡促進(jìn)作用。
[Abstract]:AIM: To investigate the effect of FBXW7 point mutation on proliferation, apoptosis, migration and invasion of colorectal cancer cell line HCT-116. Methods: The wild-type and mutant overexpression recombinant vector of FBXW7 gene was constructed and transfected into HCT-116 cells. The expression of FBXW7 protein was detected by Western blot. Cell proliferation was detected by CCK-8. Results: The expression of FBXW7 protein in HCT-116 cells transfected with wild type was higher than that in control group (transfected with mutant FBXW7). HCT-116 cells, negative control group (transfected empty vector p EZ-M90 HCT-116 cells) and blank control group (untransfected HCT-116 cells) (p value 0.05). The proliferation, clone formation, migration and invasion ability of transfected wild-type HCT-116 cells were significantly decreased compared with the other groups (P value 0.05), and the apoptosis rate was significantly increased (p 0.0.05). Conclusion: FBXW7 gene point mutation can affect the expression of FBXW7 protein, thereby reducing the proliferation, invasion and migration inhibition of FBXW7 gene in colorectal cancer cell line HCT-116 and its apoptosis-promoting effect.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R735.34

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本文編號(hào)：2203936