【摘要】：目的研究甲基茉莉酸(MeJA)、花生四烯酸(AA)、乙酰水楊酸(ASA)對三角褐指藻巖藻黃素含量及三角褐指藻ξ-胡蘿卜素脫氫酶基因(PtZDS)表達(dá)的影響。方法采用Illumina HiSeq~(TM)2000高通量測序方法獲得PtZDS的cDNA全長序列,并對其進(jìn)行生物信息學(xué)分析。利用HPLC測定MeJA、AA和ASA處理下,三角褐指藻巖藻黃素含量,RT-PCR檢測PtZDS基因的表達(dá)。結(jié)果該基因全長1 905 bp,具有一個1 776 bp的開放閱讀框,編碼591個氨基酸。推導(dǎo)的氨基酸序列分析結(jié)果表明,該蛋白具有一個典型的氨基氧化酶結(jié)構(gòu)域(amine oxidase domain)、NAD(P)-binding Rossmann-like結(jié)構(gòu)域和葉綠體轉(zhuǎn)運肽序列。系統(tǒng)進(jìn)化樹結(jié)果表明,PtZDS蛋白與假微型海鏈藻(Thalassiosira pseudonana CCMP1335)的同源性達(dá)76%,親緣關(guān)系較近,共處同一進(jìn)化支上。0.1 mg·L~(-1)AA、25 mg·L~(-1)ASA和100μmol·L~(-1)MeJA處理下三角褐指藻單位細(xì)胞內(nèi)巖藻黃素的含量達(dá)到最高。RT-PCR分析結(jié)果表明,0.1 mg·L~(-1)AA、50μmol·L~(-1)MeJA和10 mg·L~(-1)ASA處理下,PtZDS的表達(dá)水平達(dá)到最高。結(jié)論 PtZDS基因的表達(dá)可能與三角褐指藻中巖藻黃素的積累存在一定關(guān)系。100μmol·L~(-1)MeJA處理下,三角褐指藻合成巖藻黃素的能力最強(qiáng)。
[Abstract]:Objective to study the effect of (MeJA), arachidonic acid (AA), acetylsalicylic acid (ASA) on the content of algin and the (PtZDS) expression of 尉-carotene dehydrogenase gene in Phaeopsis triangularis. Methods the full-length cDNA sequence of PtZDS was obtained by Illumina HiSeq~ (TM) 2000 high throughput sequencing and bioinformatics analysis. MeJA,AA and ASA were used to detect the expression of PtZDS gene by HPLC, and the content of algin was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results the total length of the gene was 1905 bp, with an open reading frame of 1 776 bp, encoding 591 amino acids. The deduced amino acid sequence analysis showed that the protein had a typical amino oxidase domain (amine oxidase domain) nad (P) binding Rossmann-like domain and chloroplast transport peptide sequence. Phylogenetic tree results showed that the homology of PtZDS protein and (Thalassiosira pseudonana CCMP1335 was 76, and the phylogenetic relationship was close. Under the treatment of 0.1 mg L ~ (-1) AA,25 mg L ~ (-1) ASA and 100 渭 mol L ~ (-1) MeJA at the same evolutionary branch, the content of fucoflavin in the cells of Phaeophyllum triangularis reached the highest. The results of RT-PCR analysis showed that the expression level of PtZDS reached the highest level under the treatment of 0.1 mg L ~ (-1) AA,50 渭 mol L ~ (-1) MeJA and 10 mg L ~ (-1) ASA. Conclusion the expression of PtZDS gene may be related to the accumulation of alginin in Phaeodactylum triangularis. Under the treatment of .100 渭 mol L ~ (-1) MeJA, the ability of algin synthesis is the strongest.
【作者單位】： 寧波大學(xué)海洋學(xué)院;
【基金】：浙江省科技廳重點科技創(chuàng)新團(tuán)隊項目資助(2012R10029-07,2010R50029) 寧波科技攻關(guān)項目資助(2013C10018) 浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動計劃暨新苗人才計劃項目資助(2014R405050)
【分類號】：Q943.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2199795