【摘要】：針對目前轉基因(GM)產品檢測標準分子的缺乏,構建適用于轉基因水稻的標準質粒分子pMDSPS和pMDTheli,其中包含水稻內源基因SPS通用序列,耐鹽基因ThST3和Ubiquitin啟動子序列的構建特異性Theli序列。對其特異性及制備標準曲線的可靠性進行鑒定研究,研究結果顯示,在進行普通PCR擴增時,采用質粒標準分子為陽性對照,均能特異擴增目的條帶。以標準質粒分子構建的標準曲線,SPS基因的定量標準曲線的相關系數平均為0.9993,PCR擴增效率在1.0004~1.034之間;ThST3基因的定量標準曲線的相關系數平均為0.9937,PCR擴增效率在0.9358~0.9486之間。因此,構建的標準分子pMDSPS和pMDTheli既能作為普通PCR的陽性對照,也能用于定量標準曲線的構建,為轉基因水稻的定量檢測提供簡便、價格低廉的標準分子打下基礎。
[Abstract]:In view of the lack of standard molecules for the detection of transgenic (GM) products, the standard plasmid molecules pMDSPS and pMDTheli, which are suitable for transgenic rice, are constructed, which contain the common SPS sequence of rice endogenous gene. Construction of specific Theli sequence of salt tolerant gene ThST3 and Ubiquitin promoter. The specificity and reliability of the preparation standard curve were studied. The results showed that the target bands could be amplified by using plasmid standard molecule as positive control. The correlation coefficient of the quantitative standard curve of SPS gene constructed from standard plasmid molecule was 0.9993H PCR amplification efficiency between 1.00041.034 and 0.9937%. The average PCR amplification efficiency of ThST3 gene was between 0.9358and 0.9486. Therefore, the constructed standard molecule pMDSPS and pMDTheli can be used not only as positive control of ordinary PCR, but also in the construction of quantitative standard curve, which provides a simple and inexpensive standard molecule for quantitative detection of transgenic rice.
【作者單位】： 農業(yè)部農作物種子質量監(jiān)督檢驗測試中心(深圳)/深圳市農業(yè)科技促進中心;
【基金】：深圳市技術創(chuàng)新項目(CXZZ20120614165508810) 轉基因新品種培育重大專項(2009ZX08001-023B)
【分類號】：S511

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