【摘要】：為提高遼寧棉花品種的耐鹽性,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)上胚軸外植體轉(zhuǎn)化法,將來源于鹽生植物獐茅的Na~+/H~+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(AlNHX1)導(dǎo)入棉花遼棉19號中,分析影響棉花上胚軸外植體農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的幾個重要因素,建立并優(yōu)化了該品種的轉(zhuǎn)化體系,結(jié)果表明:1)農(nóng)桿菌侵染的最佳時間為90s,共培養(yǎng)過程中乙酰丁香酮最適濃度為100 mg/L,篩選培養(yǎng)基中潮霉素最適濃度為30 mg/L,生根培養(yǎng)基中吲哚乙酸IBA的最適濃度為10mg/L;2)對轉(zhuǎn)化植株進(jìn)行PCR檢測,表明耐鹽基因AlNHX1已導(dǎo)入遼棉19號中;3)在鹽脅迫下,轉(zhuǎn)基因植株的電導(dǎo)率,滲透勢都顯著低于未轉(zhuǎn)化植株。結(jié)果表明,通過篩選并優(yōu)化轉(zhuǎn)化體系,遼棉19號品種的耐鹽性有較明顯的提升,為沿海灘涂地區(qū)種植棉花提供了一定的參考。
[Abstract]:In order to improve the salt tolerance of cotton varieties in Liaoning Province, the Na- / H- antiporter gene (AlNHX1), which was derived from the halophyte, was introduced into cotton Liaomian19 by Agrobacterium tumefaciens (Agrobacterium tumefaciens) mediated transformation of epicotyl explants. Several important factors affecting the transformation of Agrobacterium tumefaciens in cotton epicotyl explants were analyzed, and the transformation system of this variety was established and optimized. The results showed that the optimal infection time of Agrobacterium tumefaciens was 90 s, the optimal concentration of acetyl eugenone was 100 mg / L, the optimum concentration of hygromycin was 30 mg / L and the optimal concentration of IBA in rooting medium was 10 mg / L ~ (2). The transformed plants were detected by PCR. The results showed that the salt tolerance gene AlNHX1 had been introduced into Liaomian19 Zhongni3) under salt stress, the conductivity and osmotic potential of the transgenic plants were significantly lower than those of the untransformed plants. The results showed that through screening and optimizing the transformation system, the salt tolerance of Liaomian19 was obviously improved, which provided a certain reference for planting cotton in coastal shoal area.
【作者單位】： 遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院大連生物技術(shù)研究所;
【基金】：遼寧省自然科學(xué)基金(2014027023)
【分類號】：S562

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本文編號：2160318