【摘要】：通過3次染色體步移克隆出黑果枸杞及其白化果實(shí)F3′5′H基因的啟動(dòng)子片段并測序。分析發(fā)現(xiàn)2個(gè)啟動(dòng)子序列的同源性高達(dá)90.3%,對(duì)啟動(dòng)子序列進(jìn)行預(yù)測,發(fā)現(xiàn)兩者中均具有TATA-Box、CAAT-Box、TCrich repeats、WUN-motif、Sp1、Box I、G-box、skin-1motif及ARE元件。另外在黑果枸杞啟動(dòng)子中預(yù)測到與茉莉酸甲酯響應(yīng)相關(guān)的元件TGACG-motif,而在黑果枸杞白化果實(shí)啟動(dòng)子中沒有預(yù)測到。將2個(gè)啟動(dòng)子片段與GUS報(bào)告基因融合構(gòu)建植物表達(dá)載體,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化煙草葉片,通過組織化學(xué)染色來確定啟動(dòng)子的啟動(dòng)活性。結(jié)果表明2個(gè)啟動(dòng)子均具有啟動(dòng)活性,利用熒光定量對(duì)2個(gè)啟動(dòng)子所驅(qū)動(dòng)的GUS基因的表達(dá)量進(jìn)行了分析,結(jié)果表明黑果枸杞啟動(dòng)子所驅(qū)動(dòng)的GUS基因的表達(dá)量是黑果枸杞白化果實(shí)的3.09倍。
[Abstract]:The promoter fragment of the F3O5H gene of Lycium barbarum and its albino fruit was cloned and sequenced by three chromosome steps. It was found that the homology of the two promoter sequences was as high as 90.3, and the promoter sequences were predicted. It was found that both of them had TATA-BoxCX CAAT-BoxCrich repeatsWUN-motif Sp1BOX G-boxskin-1motif and are elements. In addition, the element TGACG-motif related to the response of methyl jasmonate was predicted in the promoter of Lycium barbarum, but not in the promoter of albino fruit of Lycium barbarum L. The plant expression vector was constructed by fusion of two promoter fragments with Gus reporter gene and transformed into tobacco leaves by Agrobacterium tumefaciens-mediated transient transformation. The promoter activity was determined by histochemical staining. The results showed that both promoters had priming activity. The expression of Gus gene driven by two promoters was analyzed by fluorescence quantitative analysis. The results showed that the expression of Gus gene driven by the promoter of Lycium barbarum was 3.09 times higher than that of the albino fruit of Lycium barbarum L.
【作者單位】： 青海大學(xué)農(nóng)林科學(xué)院青海高原林木遺傳育種實(shí)驗(yàn)室;青海大學(xué)省部共建三江源生態(tài)與高原農(nóng)牧業(yè)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金地區(qū)科學(xué)基金項(xiàng)目(31660221) 青海省農(nóng)林科學(xué)院創(chuàng)新基金(2014-NKY-01) 青海高原林木遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(2017-ZJ-Y29)
【分類號(hào)】：S567.19

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本文編號(hào)：2125623