【摘要】：通過3次染色體步移克隆出黑果枸杞及其白化果實F3′5′H基因的啟動子片段并測序。分析發(fā)現(xiàn)2個啟動子序列的同源性高達90.3%,對啟動子序列進行預測,發(fā)現(xiàn)兩者中均具有TATA-Box、CAAT-Box、TCrich repeats、WUN-motif、Sp1、Box I、G-box、skin-1motif及ARE元件。另外在黑果枸杞啟動子中預測到與茉莉酸甲酯響應相關的元件TGACG-motif,而在黑果枸杞白化果實啟動子中沒有預測到。將2個啟動子片段與GUS報告基因融合構建植物表達載體,利用農(nóng)桿菌介導的瞬時轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化煙草葉片,通過組織化學染色來確定啟動子的啟動活性。結果表明2個啟動子均具有啟動活性,利用熒光定量對2個啟動子所驅(qū)動的GUS基因的表達量進行了分析,結果表明黑果枸杞啟動子所驅(qū)動的GUS基因的表達量是黑果枸杞白化果實的3.09倍。
[Abstract]:The promoter fragment of the F3O5H gene of Lycium barbarum and its albino fruit was cloned and sequenced by three chromosome steps. It was found that the homology of the two promoter sequences was as high as 90.3, and the promoter sequences were predicted. It was found that both of them had TATA-BoxCX CAAT-BoxCrich repeatsWUN-motif Sp1BOX G-boxskin-1motif and are elements. In addition, the element TGACG-motif related to the response of methyl jasmonate was predicted in the promoter of Lycium barbarum, but not in the promoter of albino fruit of Lycium barbarum L. The plant expression vector was constructed by fusion of two promoter fragments with Gus reporter gene and transformed into tobacco leaves by Agrobacterium tumefaciens-mediated transient transformation. The promoter activity was determined by histochemical staining. The results showed that both promoters had priming activity. The expression of Gus gene driven by two promoters was analyzed by fluorescence quantitative analysis. The results showed that the expression of Gus gene driven by the promoter of Lycium barbarum was 3.09 times higher than that of the albino fruit of Lycium barbarum L.
【作者單位】： 青海大學農(nóng)林科學院青海高原林木遺傳育種實驗室;青海大學省部共建三江源生態(tài)與高原農(nóng)牧業(yè)國家重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金地區(qū)科學基金項目(31660221) 青海省農(nóng)林科學院創(chuàng)新基金(2014-NKY-01) 青海高原林木遺傳育種重點實驗室(2017-ZJ-Y29)
【分類號】：S567.19

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本文編號：2125623