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賴氨酸與乙酸互作效應(yīng)對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成相關(guān)基因表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-07-05 06:53

  本文選題:奶牛乳腺上皮細(xì)胞 + 賴氨酸 ; 參考:《內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:本試驗(yàn)以奶牛乳腺上皮細(xì)胞(BMECs)為模型,以乳蛋白前體物賴氨酸(Lys)與乳脂肪前體物乙酸為原料,研究Lys對(duì)乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成相關(guān)基因表達(dá)的影響,在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究Lys與乙酸互作效應(yīng)對(duì)乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成相關(guān)基因表達(dá)的影響,探討Lys與乙酸對(duì)BMECs內(nèi)乳成分合成中可能存在的協(xié)同與競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系,并從轉(zhuǎn)錄和翻譯水平初步研究其影響機(jī)理,為實(shí)際生產(chǎn)中科學(xué)合理的通過(guò)乳成分前體物調(diào)控乳品質(zhì)提供理論依據(jù)。論文由3個(gè)試驗(yàn)組成:試驗(yàn)1采用單因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì),研究不同濃度Lys(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0mmol/L)對(duì)BMECs內(nèi)乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成相關(guān)基因表達(dá)的影響,篩選適宜的Lys培養(yǎng)濃度,其中,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中Lys濃度為0.5 mmol/L(對(duì)照)。結(jié)果表明:適宜濃度Lys與ATP含量、細(xì)胞增殖、CSN1S1、CSN3、mTOR、eIF4E和AMPKα1基因表達(dá)及mTOR、S6K1和AMPK磷酸化水平存在顯著或趨于顯著的劑量依賴關(guān)系;以Lys為1.0~2.0 mmol/L時(shí)促進(jìn)效果較好,但16.0 mmol/L組抑制CSN1S1、CSN3、STAT5及mTOR信號(hào)通路基因表達(dá),1.0~16.0 mmol/L組抑制4EBP1基因表達(dá)。Lys對(duì)甘油三酯(TAG)含量、FABP3、LPL、FASN、AGPAT6和GPAM基因表達(dá)的影響呈顯著或趨于顯著的劑量依賴關(guān)系,以2.0~4.0 mol/L時(shí)促進(jìn)效果較好,但16.0 mmol/L組降低了SREBP1基因及蛋白表達(dá),抑制了PPARG、FASN、SCD1、AGPAT6和GPAM基因表達(dá)。Lys對(duì)乳糖含量和GLUT1、HKI和HKII基因表達(dá)的影響呈顯著的劑量依賴效應(yīng),以2.0~8.0 mmol/L時(shí)乳糖合成效果較好,但1.0~2.0 mmol/L組抑制HKII基因表達(dá),16.0 mmol/L組抑制或減弱葡萄糖磷酸化和乳糖合成。綜合得出,Lys為2.0 mmol/L時(shí)促進(jìn)效果較好。試驗(yàn)2采用2×6二因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì),研究乙酸對(duì)BMECs內(nèi)乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成相關(guān)基因表達(dá)的影響是否與Lys的劑量有關(guān)。因素一為L(zhǎng)ys濃度,設(shè)0.5和2.0 mmol/L 2個(gè)水平,因素二為乙酸濃度,設(shè)0、4.0、6.0、8.0、10.0和12.0mmol/L6個(gè)水平,探討Lys和乙酸在乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成中是否存在的互作效應(yīng)及適宜組合。結(jié)果表明:乙酸促進(jìn)乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成相關(guān)基因和蛋白表達(dá)及磷酸化水平,高劑量乙酸減弱或抑制對(duì)其作用的促進(jìn)效果,以6.0 mmol/L時(shí)促進(jìn)效果較好。Lys對(duì)乳蛋白、乳脂肪和乳糖的影響與試驗(yàn)1的結(jié)果相似,但較試驗(yàn)1抑制HKI表達(dá)。增加Lys濃度,可促進(jìn)乙酸對(duì)STTAT5和elF4E基因表達(dá)及mTOR信號(hào)通路相關(guān)蛋白磷酸化水平的上調(diào)作用,緩解乙酸對(duì)CSN1S1基因表達(dá)的抑制作用;促進(jìn)乙酸對(duì)長(zhǎng)鏈脂肪酸攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)、脂滴形成相關(guān)基因表達(dá)及PPARG和SREBP1基因與蛋白表達(dá)的上調(diào)作用;促進(jìn)乙酸對(duì)β-4GALT1表達(dá)的上調(diào)作用,但抑制乙酸對(duì)HKI基因表達(dá)的促進(jìn)作用,說(shuō)明乙酸對(duì)乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成的作用效果與Lys的劑量有關(guān)。綜合以Lys為2.0 mmol/L、乙酸為6.0 mmol/L的組合促進(jìn)效果較好。試驗(yàn)3采用2×6二因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì),研究Lys對(duì)BMECs內(nèi)乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成相關(guān)基因表達(dá)的影響是否與乙酸的劑量有關(guān)。因素一為乙酸濃度,設(shè)0和6.0 mmol/L 2個(gè)水平,因素二為L(zhǎng)ys濃度,設(shè)0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0 mmol/L 6個(gè)水平,進(jìn)一步探討Lys和乙酸在乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成中存在的互作效應(yīng)發(fā)揮出最大協(xié)同作用的適宜組合。結(jié)果表明:乙酸對(duì)乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成相關(guān)基因表達(dá)的影響與試驗(yàn)2的結(jié)果相似;Lys對(duì)乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成相關(guān)基因表達(dá)的影響與試驗(yàn)1和試驗(yàn)2的結(jié)果相似。乙酸促進(jìn)Lys對(duì)ATP含量、CSV2、CSN3、JAK2基因表達(dá)和mTOR信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)及磷酸化水平的上調(diào)作用,增強(qiáng)Lys對(duì)細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用,但抑制低濃度Lys對(duì)CSN1S1表達(dá)的促進(jìn)作用,緩解高濃度Lys對(duì)其表達(dá)的抑制作用;促進(jìn)Lys對(duì)SREBP1和PPARP基因與蛋白及下游靶基因表達(dá)的上調(diào)作用,緩解Lys對(duì)AGPAT6的抑制效果,但抑制Lys對(duì)LPI和SCD1表達(dá)的促進(jìn)作用;上調(diào)Lys對(duì)乳糖合成相關(guān)基因表達(dá)的促進(jìn)作用,減緩Lys對(duì)HKII表達(dá)的抑制作用。綜合以乙酸為6.0 mmol/L、Lys為1.0~2.0 mmol/L的組合促進(jìn)效果較好。綜合各項(xiàng)指標(biāo)得出,Lys與乙酸互作效應(yīng)對(duì)乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成相關(guān)基因表達(dá)有顯著的調(diào)節(jié)作用,可能通過(guò)JAK2/STAT5和mTOR信號(hào)通路調(diào)控乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成,且BMECs對(duì)Lys和乙酸的利用存在協(xié)同和競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系,以Lys為2.0 mmol/L、乙酸為6.0 mmol/L組合對(duì)乳蛋白、乳脂肪和乳糖合成的促進(jìn)效果較好。
[Abstract]:The effects of Lys ( 0.5 , 1.0 , 2.0 , 4.0 , 8.0 and 16.0 mmol / L ) on the synthesis of milk protein , milk fat and lactose were studied . The effects of Lys on the expression of protein , milk fat and lactose in milk protein , milk fat and lactose were studied . The results showed that the effect of Lys on milk protein , milk fat and lactose synthesis was similar to that of test 1 . Milk fat and lactose synthesis related gene expression has a significant regulatory effect , which may regulate milk protein , milk fat and lactose synthesis through the regulation of the 2 / STAT5 and mtor signaling pathways , and BMECs has a synergistic and competitive relationship with the use of Lys and acetic acid , with a Lys of 2.0 mmol / L and acetic acid of 6.0 mmol / L to improve the synthesis of milk protein , milk fat and lactose .
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:S823

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2099368

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