RFP轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立
本文選題:紅色熒光蛋白(RFP) + 載體; 參考:《黑龍江畜牧獸醫(yī)》2017年19期
【摘要】:為了建立組織廣泛表達(dá)紅色熒光蛋白(red fluorescence protein,RFP)的轉(zhuǎn)基因小鼠,為腫瘤和干細(xì)胞等研究提供動物模型,試驗(yàn)從pdsred-express2-n1載體上酶切后獲得線性化的CMV-Dsred基因片段,將CMV-Dsred基因注入ICR小鼠受精卵雄原核內(nèi),獲得的仔鼠利用活體熒光蛋白觀察系統(tǒng)、PCR和Southern-blot的方法進(jìn)行分子水平的檢測,同時用后代小鼠的組織制作冰凍切片在熒光顯微鏡下觀察。結(jié)果表明:熒光蛋白活體成像系統(tǒng)檢測到組織廣泛表達(dá)紅色熒光蛋白的小鼠,陽性小鼠基因組中均檢測到Dsred基因的整合,在心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腸道、子宮、肌肉、脂肪和皮膚等組織器官中均檢測到紅色熒光蛋白。說明成功獲得了組織廣泛表達(dá)紅色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠模型。
[Abstract]:In order to establish transgenic mice with widely expressed red fluorescent protein (red fluorescence protein (RFP), and to provide animal models for tumor and stem cell studies, a linearized CMV-Dsred gene fragment was obtained from pdsred-express2-n1 vector after restriction endonuclease digestion. CMV-Dsred gene was injected into the male pronucleus of ICR mouse fertilized eggs. The offspring were detected at molecular level by PCR and Southern-blot, and frozen sections were made from the tissues of progeny mice under fluorescence microscope. The results showed that in vivo fluorescence imaging system, the tissues of mice with widely expressed red fluorescent protein were detected, and the integration of Dsred gene was detected in the genomes of positive mice, including heart, liver, spleen, lung, kidney, intestine, uterus, liver, spleen, lung, kidney, intestine, uterus, kidney, intestine and uterus. Red fluorescent protein was detected in muscle, fat and skin. The results showed that the transgenic mouse model of widely expressing red fluorescent protein was successfully obtained.
【作者單位】: 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院廣東省農(nóng)業(yè)動物基因組學(xué)與分子育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院動物科技學(xué)院;
【基金】:國家“973”計劃專項(2011CB944202) 河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院博士科研啟動基金項目(51000788)
【分類號】:Q78;S865.13
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本文編號:2095304
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