AcMNPV p95基因一段339 bp序列在病毒復(fù)制中的作用
本文選題:桿狀病毒 + p; 參考:《復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2017年02期
【摘要】:桿狀病毒苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒(AcMNPV)的p95基因編碼的P95蛋白是病毒核衣殼的組成部分,也是蟲體經(jīng)口感染相關(guān)因子PIF(Per os Infectivity Factor)復(fù)合體的組成部分.前期研究表明,完整的P95蛋白對(duì)病毒的復(fù)制是非必需的,其中一段450bp的序列可以部分彌補(bǔ)p95基因的作用.本研究將p95基因一段339bp的片段(Core339,AcMNPV基因組位置:69 576~69 914bp)以正反兩個(gè)方向分別插入到p95基因敲除的AcMNPV基因組中多角體位點(diǎn)的polyA之后,構(gòu)建了兩株重組病毒vP95K/EGFP/339+和vP95K/EGFP/339-.該兩株病毒能在Sf9細(xì)胞中正常復(fù)制,復(fù)制水平與p95基因正常的AcEGFP相當(dāng),但復(fù)制速度較慢.重組病毒感染細(xì)胞的Western blot分析未檢測(cè)到P95蛋白的表達(dá).這一結(jié)果表明P95蛋白的缺失對(duì)病毒在細(xì)胞中的復(fù)制沒(méi)有顯著影響,但核心片段Core339對(duì)于病毒復(fù)制具有關(guān)鍵作用.
[Abstract]:The p95 protein encoded by the nuclear polyhedrosis virus (AcMNPV) is a part of the nucleocapsid and the PIF (Peros Infectivity Factor) complex of the baculovirus. Previous studies have shown that the complete P95 protein is not necessary for the replication of the virus, and one of the 450bp sequences can partly compensate for the role of the p95 gene. In this study, a 339bp fragment of p95 gene (Core339AcMNPV genomic position: 69 57669 914bp) was inserted into the polyhedron polyA of the p95 knockout AcMNPV genome in both positive and negative directions. Two recombinant viruses, vP95K / EGFP / 339 and vP95K / EGFP / 339-respectively, were constructed. The two viruses can replicate normally in Sf9 cells, and the replication level is similar to that of AcEGFP with normal p95 gene, but the rate of replication is slow. The expression of P95 protein was not detected by Western blot analysis. The results showed that the deletion of P95 protein had no significant effect on virus replication in cells, but the core fragment Core339 played a key role in virus replication.
【作者單位】: 復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物學(xué)與微生物工程系;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31370183)
【分類號(hào)】:Q939.4
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,本文編號(hào):2095029
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