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植物乳桿菌KLDS1.0391 luxS基因敲除載體的構(gòu)建與應(yīng)用

發(fā)布時間:2018-06-30 00:04

  本文選題:食品科學(xué) + 植物乳桿菌。 參考:《中國科技論文》2016年06期


【摘要】:構(gòu)建植物乳桿菌KLDS1.0391的luxS基因敲除載體并實現(xiàn)基因敲除。以植物乳桿菌KLDS1.0391的基因組為模板,采用PCR方法擴增luxS側(cè)翼序列l(wèi)uxSL、luxSR并分別克隆至pMD19-T simple中,鑒定正確后酶切,與敲除載體pNZ5319連接,鑒定正確后轉(zhuǎn)入大腸桿菌DH5α中保存。采用電轉(zhuǎn)化方法將敲除載體導(dǎo)入植物乳桿菌KLDS1.0391,構(gòu)建luxS基因敲除菌株。結(jié)果表明,植物乳桿菌luxS基因敲除載體pNZ5319-luxS構(gòu)建成功,測序結(jié)果證實該菌中存在2個luxS基因且成功敲除1個。所得結(jié)果為進一步研究luxS基因在植物乳桿菌KLDS1.0391的代謝和群體感應(yīng)中的重要作用奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:LuxS gene knockout vector of Lactobacillus plantarum KLDS1.0391 was constructed and gene knockout was realized. Using the genome of Lactobacillus plantarum KLDS1.0391 as template, luxS flanking sequence luxS luxSLluxSR was amplified by PCR and cloned into pMD19-T simple. The product was digested and ligated with knockout vector pNZ5319, and then transferred into Escherichia coli DH5 偽. The knockout vector was introduced into Lactobacillus plantarum KLDS1.0391by electric transformation, and the luxS gene knockout strain was constructed. The results showed that the luxS gene knockout vector pNZ5319-luxS of Lactobacillus plantarum was successfully constructed. The results laid a foundation for further study on the important role of luxS gene in the metabolism and population induction of Lactobacillus plantarum KLDS1.0391.
【作者單位】: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)乳品科學(xué)教育部重點實驗室;
【基金】:高等學(xué)校博士學(xué)科點專項科研基金資助項目(20122325110017) 哈爾濱市杰出青年人才基金資助項目(2014RFYXJ006)
【分類號】:Q78

【參考文獻】

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本文編號:2083955

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