本文選題：RNA干擾 + BmNPV　； 參考：《病毒學(xué)報》2017年05期

【摘要】：家蠶核型多角體病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是影響蠶業(yè)生產(chǎn)最為嚴(yán)重的病原之一,每年對我國蠶業(yè)生產(chǎn)方面造成很大的經(jīng)濟損失。通過RNA干擾技術(shù)(RNAi)干擾BmNPV的增殖關(guān)鍵基因可以有效地抑制病毒的增殖復(fù)制。本研究以BmNPV侵染關(guān)鍵基因gp64和lef-1為靶標(biāo)基因,并利用病毒誘導(dǎo)型啟動子LEF3P和39KP共構(gòu)建了4種RNAi干擾表達載體,分別命名為:piggyBacA3-EGFP-39KP-gp64、piggyBacA3-EGFP-39KP-lef-1、piggyBacA3-EGFP-LEF3P-gp64、piggyBacA3-EGFP-LEF3P-lef-1。經(jīng)瞬時轉(zhuǎn)染和篩選穩(wěn)定表達的家蠶細胞系抗病毒檢測結(jié)果表明,通過RNAi技術(shù)能夠有效的抑制病毒增殖復(fù)制,并確定了39KP啟動效果優(yōu)于LEF3P啟動子,干擾gp64基因的抗病毒效果優(yōu)于lef-1基因。這些研究結(jié)果為后期轉(zhuǎn)基因品系培育和家蠶抗病毒研究提供了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Bombyx mori nucleopolyhedrovirusBmNPV is one of the most serious pathogens affecting sericulture. RNA interference (RNAi) can effectively inhibit the replication of BmNPV by interfering with the key genes of BmNPV proliferation. In this study, four RNAi interference expression vectors were constructed using the virus inducible promoter LEF3P and 39KP as target genes, and named as: piggyBacA3-EGFP-39KP-gp64-piggyBacA3-EGFP-lef-1piggyBacA3-EGFP-LEF3P-gp64piggyBacA3-EGFP-LEF3P-lef-1. The results of transient transfection and screening of stable expression silkworm cell lines showed that RNAi technology could effectively inhibit virus proliferation and replication, and confirmed that 39KP promoter was superior to LEF3P promoter. The antiviral effect of interfering gp64 gene was better than that of lef-1 gene. These results provide a basis for the breeding of transgenic lines and the study of silkworm antivirus.
【作者單位】： 西南大學(xué)家蠶基因組生物學(xué)國家重點實驗室;西南大學(xué)農(nóng)業(yè)部家蠶功能基因組和生物學(xué)重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(項目號:31472152),題目:家蠶核型多角體病毒lef11基因?qū)Σ《驹鲋车恼{(diào)控研究 國家蠶桑產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(項目號:CARS-22),題目:西南蠶病防控~~
【分類號】：S884.51

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本文編號：2063399